蛋白质的离子交换层析技术研究进展.pptVIP

降低初始上样缓冲液离子强度注意计算蛋白质的等电点树脂应充分平衡或用严格的再生方法初始上样缓冲液离子强度过大树脂pH值因解吸作用而发生变化树脂未进行适当平衡或再生的树脂未洗净5.2蛋白质不与树脂结合问题处理本文档共34页；当前第28页；编辑于星期六\16点51分树脂上的蛋白质未洗净pH值不合适或蛋白质发生沉淀水解酶破坏了目的蛋白或树脂中有微生物滋生5.3纯化蛋白质的产率低增强溶液离子强度；更换活性高的反离子或使用去垢剂等方法解决。适当调节PH蛋白提取过程中应加水解酶抑制剂抑制蛋白水解问题处理本文档共34页；当前第29页；编辑于星期六\16点51分5.4蛋白质分辨效果差流速太快或层析柱过短梯度洗脱时洗脱液浓度变化太快上柱蛋白质过多降低流速可采用连续洗脱等梯度变化较慢的洗脱减少上样量问题处理本文档共34页；当前第30页；编辑于星期六\16点51分6.应用实例混合物的分离6.1蛋白质的柱上复性6.2本文档共34页；当前第31页；编辑于星期六\16点51分6.1混合物的分离Bio-Rex70层析分离眼镜蛇神经毒素的6种单乙酰基衍生物眼镜蛇神经毒素，一种小分子碱性蛋白，分子中6个氨基（5个侧链Lys残基和一个游离的N端氨基）均能被乙酰化生成乙酰基衍生物,形成的6种