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- 2023-12-19 发布于江苏
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第八章 电泳;本章主要知识点;SDS电泳的基本原理及过程
琼脂糖电泳的特点及其应用
等电聚焦电泳的基本原理
双相电泳的概念及其特点;电泳的简单原理;;电泳:是荷电溶质在电场作用下发生定向泳动的现象。
电泳分离是利用荷电溶质在电场中泳动速度的差别进行分离的方法。
20世纪初,电泳法用于蛋白质的分离,20世纪70年代,电泳多用于分析目的。;(1)自由电泳:是最早的一种电泳形式,目前已很少使用。
瑞典管内蛋白质溶液和缓和液间有清晰可见界面,然后加一电场,由于界面处存在浓度梯度因而产生折射梯度,利用适当的光学系统可以观察到界面的移动。;在电泳过程中,每个移动的界面相当于某一特定的蛋白质,通过一定计算可得其泳动度。;缺点:电泳中因通电发热等原因而引起的对流,常回使已分离的溶质重新混合,为防止对流,可将电泳在多孔介质中进行,称为区带电泳。
区带电泳:应用支持介质的电泳,它表示在一个电场的作用下,在某一支持物上能将一个样品组成彻底分离成若干条区带的过程。;(2)区带电泳:在支持物上电泳时蛋白质混合物被成若干区带。
根据支持物物理性质的不同可分为4类:
滤纸电泳和薄膜电泳,粉末电泳,细丝电泳,凝胶电泳。
多孔介质称为载体,应用最普通的是以滤纸或凝胶为载体故称为纸电泳法或凝胶电泳法。;第一节 凝胶电泳法;聚丙烯酰胺凝胶电泳中的分子筛效应;分子筛效应;常用的凝胶材料:聚丙烯酰胺、琼脂糖凝胶。
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