《仪器分析》第八章液相色谱分析课件.pptxVIP

液相色谱法;HPLC与GC的区别：;1 固定相和流动相;（2）流动相;2 高效液相色谱仪;主要部件：;(5)进样器;(6)色谱柱;(7)检测器;?荧光检测器－灵敏度比紫外高2个数量级;?示差折光检测器

通用型，灵敏度低，温度影响大，不能用于梯度淋洗；偏转式、反射式和干涉型三种；;?电化学检测器

电导检测器、库仑检测器、伏安检测器以及安培检测器。;3 液-固色谱法;（2）固定相

常用的是表面多孔和全多孔微粒型硅胶、氧化铝等。一般采用5-10?m全多孔微粒。;（3）流动相;键合反应类型：;3.Si-O-Si-C键型（硅胶和有机硅烷的反应）;（2）正相键合相色谱;反相色谱流动相;反相色谱中的离子抑制法;影响离子对色谱保留值的因素：;5 离子交换色谱法;（2）固定相;（3）流动相;（4）离子色谱法;双柱离子色谱（抑制离子色谱）;分离阴离子，一般用NaOH或者NaHCO3做淋洗剂，强酸性高容量阳离子交换剂做抑制柱，在抑制柱内产生两个重要反应：

R-H++Na+OH-----R-Na++H2OR-H++Na+X-----R-Na++H+X-

淋洗液在抑制柱上反应，淋洗离子变成水或者碳酸（NaHCO3时），使本底电导大大降低。样品离子转变成相应的酸，而且由于H+的离子淌度是Na+的7倍，同时提高了检测阴离子的灵敏度。;膜离子抑制器

抑制柱必须再生，寿命短。为了克服这个缺点，采用具有磺酸基或季胺基团的聚苯乙烯多孔纤维制成的离子交换膜管，管内流过洗脱液，管外流过离子交换再生液。;6 尺寸排阻色谱法;凝胶色谱柱床的体积分布;Ve=Vm+VSa

式中Ve是淋洗体积，即溶质保留体积，VSa是一定分子大小的溶质渗进孔穴所占的体积，是VS的一部分，是溶质分子量的函数。VSa和VS之比定义为分配系数KGPC：;相对分子量校准曲线;（2）固定相;孔径大小是非常重要的参数，它表明可分离的相对分子量的范围。;（3）流动相;7 分离模式选择与应用;8 超临界流体色谱法;特点：;（2）仪器;（2）固定相;（3）流动相;（4）检测器;H～u曲线如下图，解释原因。