非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳.docx

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native)的分类

有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法：bluenative〔BN〕，clearnative

〔CN〕，quantitativepreparativenativecontinuous〔QPNC〕。

在一个典型的nativePAGE方法中，复合物被CN或BN别离。然后可以用其

它别离方法如SDS或等电聚焦做进一步别离。随后切割凝胶，蛋白复合物每一个部

分都被分开。蛋白的每个条带可以消化后做肽链指纹图谱或重新测序。这样就可以提供一个蛋白复合物中单个蛋白的重要信息。

BlueNativePAGE

BlueNativePAGE是最古老的Native技术。是以考马斯亮蓝作为电泳别离后蛋白

质鉴定染料的一种电泳方法。这种方法的缺点是：考马斯亮蓝与蛋白的结合起到了去垢剂的作用，可能导致复合物的别离；并对化学发光或蛋白质辅基的荧光或荧光染料的标记具有潜在的猝灭作用。

BlueNativePAGE在分析蛋白质-蛋白质相互作用以及膜蛋白复合物方面有很大的优势，其

别离范围在100KDa-10MDa。在BluenativePAGE过程中，最重要的化合物就是考马斯

亮蓝，除了增溶作用以外，蛋白质外表结合了大量的考马斯亮蓝染料而带上负电荷，这会导

致即使碱性蛋白在pH7.5条件下也会向阴极迁移。但是，蛋白质虽然带有大量的负电