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基因工程简介生物工程基因工程的基本内容例：基因工程培育抗虫棉的简要过程基因操作的工具限制性内切酶限制性内切酶思考DNA连接酶基因的运载体质粒基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤基因工程的成果与发展前景基因工程与医药卫生基因工程与医药卫生基因工程与医药卫生基因工程与农牧业、食品工业基因工程与农牧业、食品工业基因工程与农牧业、食品工业基因工程与农牧业、食品工业基因工程与农牧业、食品工业基因工程与环境保护基因工程的弊端**概念：也叫生物技术，是生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性科学技术。特点：以生物科学为基础，运用先进的科学原理和工程技术手段来加工或改造生物材料，如DNA、蛋白质、染色体、细胞等，从而生产出人类所需要的生物或生物制品。基因工程细胞工程发酵工程酶工程生物工程基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。

人类需要的基因产物结果剪切→拼接→导入→表达基本过程DNA分子水平操作水平基因操作对象生物体外操作环境基因拼接技术或DNA重组技术基因工程的别名苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因与运载体DNA拼接棉花植株导入要解决的问题：1、如何从苏云金芽孢杆菌中辨别出所需基因并把它切割下来；2、如何将切割下来的抗虫基因与棉的DNA“缝合”起来。基因的剪刀——限制性内切酶（一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子）基因的针线——DNA连接酶基因的运输工具——运载体（如质粒、噬菌体和动植物病毒等）分布：主要在微生物中。作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。结果：产生粘性未端（碱基互补配对）。举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫做黏性末端。限制酶要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端。如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。连接的部位：磷酸二酯键（梯子的扶手），不是氢键（梯子的踏板）。运载体必须具备的条件：1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；2、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；3、具有某些标记基因，便于进行筛选。（如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等）外源基因（如抗虫基因）导入受体细胞（如棉花细胞）需要运输工具——运载体。运载体的作用：1、作为运载工具，将外源基因转移到受体细胞中去。2、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制。质粒是基因工程最常用的运载体，它广泛地存在于细菌中，是细菌染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子，大小只有普通细菌拟核DNA的百分之一。质粒能够“友好”地“借居”在宿主细胞中。一般来说，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。但是，质粒的复制则只能在宿主细胞内完成。提取目的基因从供体细胞的DNA中直接分离基因（如“鸟枪法”）人工合成基因反转录法化学合成法目的基因是人们所需要转移或改造的基因。如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。三种目的基因提取方法的优缺点仅限于合成核苷酸对较少的简单基因专一性

最强化学

合成法操作过程麻烦，mRNA很不稳定，要求的技术条件较高专一性强反转录法工作量大，盲目，分离出来的有时并非一个基因操作简便广泛使用鸟枪法缺点优点目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达检测：通过检测标记基因的有无来判断目的基因是否导入。表达：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达。常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。目的基因导入受体细胞的方法1、将细菌用CaCl2处理，以增大细菌细胞壁的通透性。2、使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。3、目的基因在