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一、简答题
1.沉淀蛋白质的方法有哪些?
答:
(1)盐析法,此方法并未破坏蛋白质天然状态,沉淀出的蛋白质可不
变性,所以盐析法是分离制备蛋白质或蛋白类生物制剂的常用方法。(2)
有机溶剂沉淀法,通过破坏蛋白质的水化膜而使蛋白质沉淀,此方法在常
温下可使蛋白质变性,低温下可使变性速度减慢。(3)重金属盐沉淀法,
可与蛋白质结合形成不溶于水的蛋白质盐沉淀,引起蛋白质变性。临床用
于救重金属盐中毒。
2.酶促反应速率(V),达到最大反应速率为Vmax的80%,计算底物浓度[S]
与Km值的比值为?
答:
当V达到Vmax的80%时,即(V=0.8V_{max))。
将V代入方程式,得到:[0.8V_{max)=\frac{0.8V_[max}[S]HK_m
+[S]}]
整理方程式,得到:[K_m+[S]=[S]]
解得:[\frac[[S]XK_m}=1]
因此,底物浓度[S]与Km值的比值为1。
二、论述题
请详细描述出糖在体内糖酵解和三羧酸循环的过程。
答:
1.糖酵解过程:
糖酵解是一种在细胞质中进行的代谢过程,将葡萄糖分解为乳酸或乙
醇和二氧化碳,在没有氧气的情况下产生少量ATP。
步骤:
磷酸化:葡萄糖经过磷酸化反应转化为葡萄糖-6-磷酸。分解:葡萄糖-6-磷酸分解为两分子的丙酮酸,然后进一步分解为乳酸
或乙醇和二氧化碳。
产物:产生少量ATP和代谢产物(乳酸或乙醇和二氧化碳)。
2.三羧酸循环过程:
三羧酸循环是在线粒体内进行的代谢过程,将代谢产物(如葡萄糖、
脂肪酸等)氧化分解为二氧化碳和水,并产生大量ATP。
步骤:
乳酸酸化:如果糖酵解产生乳酸,乳酸会被氧化为丙酮酸,然后进入
三羧酸循环。脂肪酸氧化:脂肪酸经过氧化反应产生乙酰辅酶A,乙酰辅酶
A进入三羧酸循环。三羧酸循环:乙酰辅酶A与草酰乙酸结合生成柠檬酸,
随后在一系列酶催化下进行氧化还原反应,最终产生二氧化碳、ATP和代谢
产物。
产物:产生大量ATP、二氧化碳和水。
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