生物化学实验市公开课金奖市赛课一等奖课件.pptxVIP

生物化学实验;;四、试验室规则;五、试验汇报书写;试验一分光光度法;一、实验目：;单色光与复色光;γ射线;二、分光光度法概念;;特点;三、分光光度法基本原理;1.物质对光选择性吸取;当依次将各种波长单色光通过某一有色溶液,测量每一波长下有色溶液对该波长光吸取程度(吸光度A)，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条曲线，称为该溶液吸取光谱。;可见、紫外吸取光谱示意图;

物质对不同色光能有选择性吸取,即一定物质主要吸取一定波长光(互补吸取)，是因为物质本身分子、原子都处于一定能级运动状态，当物质吸取了光辐射能以后，会产生能级跃迁，产生吸取光谱。;2.光吸取基本定律;透光度T(%)与吸光度A;;透光度与吸光度互相关系

溶液透光度与吸光度呈负相关。

;1.Lamber定律—吸光度与液层厚度关系

1760年，Lamber指出，当单色光通过浓度一定、均匀吸取溶液时，该溶液对光吸取程度与液层厚度L成正比。

;吸光度与光程（厚度：L）关系A=KLc;

2.Beer定律—吸光度与溶液中吸光物质浓度关系关系

1852年，Beer指出，当单色光通过液层厚度一定、均匀吸取溶液时，该溶液对光吸取程度与溶液中吸光物质浓度C成正比。

;吸光度与浓度关系A=KLc;

3.Lamber-Be