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第一讲:生命系统的结构层次
第一节——显微镜的基本构造和使用方法
一、显微镜的使用
(1)观察细胞形态结构的常用工具是显微镜。
(2)显微镜结构
注意:A.用于调节光线强弱的是遮光器;
B.使镜筒较大范围升降的是粗准焦螺旋;
C.使镜筒较小范围升降的是细准焦螺旋。
(3)显微镜使用的主要步骤:安放、对光、放片、调焦、观察
①安放:取镜时右手握镜臂,左手托镜座。镜筒在前,镜臂在后,
置于接近光源、靠身体前方略偏左。
②对光——三对:
A.转动物镜转换器,使低倍物镜正对通光孔;
B.转动遮光器,选取最大光圈对准通光孔;
C.左眼观察目镜,调节反光镜对准光源,选取适宜的光圈和反光镜(光线强:小光圈、平面镜;光线弱:大光圈、凹面镜),直至从目镜里看到一个白色明亮的圆形视野。
③放片:将玻片标本放在载物台上,使待检查部分位于通光孔中心,用压片夹压住载玻片两端。
④调焦:先粗后细,先低后高。
A.两眼从侧面盯住物镜,顺时针(向前)转动粗准焦螺旋,使镜筒先下降,直到接近玻片;
注意:这一步双眼盯着物镜的目的是防止物镜压碎玻片标本和损伤物镜。
B.左眼注视目镜,逆时针(向后)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,当看到物像时停止;
C.最后用细准焦螺旋调节,直到物像看清为止。
⑤观察:左眼观察,右眼睁开,便于记录。
(4)放大倍数不够时:换用高倍镜的操作步骤-----此时细胞数目变少,体积变大,视野变暗
①将要观察的物象移到视野中间②转动转换器让高倍物镜对准通光孔
③调节细准焦螺旋使物象清晰
二、观察动物细胞和植物细胞
(1)显微镜下观察的材料要薄且透明。
(2)制作洋葱表皮细胞装片:
①擦:用洁净纱布擦净载玻片和盖玻片
②滴:用滴管在洁净载玻片中央滴一滴清水(目的:保持细胞原来形状)
③撕:将洋葱鳞片切成小块,用镊子从鳞片内测撕下洋葱表片
④展:把撕下的洋葱表皮放在载玻片中央的水滴中,用镊子展平
⑤盖:用镊子取盖玻片,先将一侧靠近清水,待清水充满两玻片夹角后,慢慢放下(防止气泡产生),盖在洋葱表皮上(玻片与水平面成45度角)
⑥染:在盖玻片一侧滴一滴红墨水或碘液,用吸水纸吸去多余水分后,使染液浸润全部标本(染色的目的是便于观察液泡)
⑦用显微镜观察洋葱表皮细胞临时装片
(3)制作人体口腔上皮细胞装片:选用较小光圈,图像界限比较清晰
①擦:用洁净纱布擦净载玻片和盖玻片
②滴:用滴管在洁净载玻片中央滴一滴生理盐水(0.9%氯化钠溶液)
(滴生理盐水而不滴清水的原因:维持细胞原来形状,防止细胞吸水,导致膨胀破裂)
③刮:用消毒牙签在自己漱净的口腔内壁轻轻的刮几下
④涂:把牙签上的刮下来的口腔上皮细胞涂在生理盐水(0.9%)中(均匀涂抹);
⑤盖:用镊子取盖玻片,先将一侧靠近清水,待清水充满两玻片夹角后,慢慢放下(防止气泡产生),盖在口腔上皮细胞上
⑥染:在盖玻片一侧滴一滴亚甲基蓝溶液或碘液,用吸水纸吸去多余水分后,使染液浸润全部标本
⑦用显微镜观察口腔上皮表皮细胞临时装片
三、观察临时装片时常见问题的原因
A.视野中有许多黑色圆圈:盖玻片时气泡太多。
B.视野中有污点:先旋转目镜,若污点不动,则不目镜上;若污点动,则在目镜上。
若污点在物镜上,则移动玻片标本,污点不动。反之,则在玻片标本上。
C.视野中细胞有重叠现象:洋葱表皮细胞撕得太厚或洋葱表皮细胞未在载玻片上展平。
D.视野太亮:把大光圈换成小光圈;把凹面镜换成平面镜。
E.视野太暗:把小光圈换成大光圈;把平面镜换成凹面镜。
F.观察物象不在视野中央:玻片标本没有对着通光孔的中间。
G.细胞结构看不太清楚:未染色。
H.压碎装片:用高倍镜头、镜筒下落、向前转动粗准焦螺旋。
I.看不到白亮视野:物镜、反光镜或光圈没有对准通光孔。
J.在细胞结构中染色颜色最深的是细胞核。
四、常考点
放大倍数不够时:换用高倍镜的操作步骤-----此时细胞数目变少,体积变大,视野变暗
①将要观察的物象移到视野中间②转动转换器让高倍物镜对准通光孔
③调节细准焦螺旋使物象清晰
A.调节视野明暗的是反光镜或遮光器;调节视野清晰度的是细准焦螺旋。
B.光线强弱问题:
①光线强:小光圈、平面镜;②光线弱:大光圈、凹面镜。
C.显微镜的放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数。
D.目镜和物镜的区别:
①目镜:无螺纹,镜头长度越长放大倍数越小,视野越亮;
②物镜:有螺纹,镜头长度越长放大倍数越大,视野越暗。
E.低高倍镜的区别:
①低倍镜下,观察范围大,细胞数目多,体积小,视野亮,物镜离玻片标本远;
②高倍镜下,观察范围小,细胞数目少,体积大,视野暗,物镜离玻片标本近。
F.分析视野中的污点:-----污点决不会在反光镜上
转动目镜,若污点动,说明污点在目镜上;若不动,再移动玻片标
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