医学免疫学实习指导.docVIP

西安交通大学医学院免疫教研室二00四年一月主编:刘如意主审:袁育康范桂香

西安交通大学医学院免疫教研室

二00四年一月

主编:刘如意

主审:袁育康范桂香

参编：谢明王军阳周晓勃雷艳君任会勋史霖

医学免疫学

实习指导

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目录

TOC\o1-3\h\u3455免疫学实验的目的和要求 2

5323实验室规则 2

1849第一篇非特异性免疫检测 3

18283实验一血脑屏障作用 3

28433实验二吞噬细胞的功能试验 4

29530实验三溶菌酶的溶菌作用 7

6398实验四血清总补体活性测定（CH50单位测定） 9

25609第二篇特异性体液免疫检测 11

5301实验五凝集反应 11

15413实验六沉淀反应 17

3163实验七补体结合反应 25

11877实验八中和实验（Neutrlizationtest） 29

7556实验九免疫标记技术 33

27231实验十免疫血清的制备及效价测定 40

10074实验十一体外抗体形成细胞检查法（溶血空斑实验PFC） 43

28470第三篇细胞免疫检测 46

7915实验十二E-玫瑰花环形成实验 46

12003实验十三淋巴细胞转化实验 48

17127第四篇：免疫病理反应 52

6021实验十四豚鼠速发型过敏反应 52

4699实验十五免疫复合物型超敏反应 53

30650实验十六豚鼠结核菌素试验 55

17959实验十七小鼠DNFB试验 56

免疫学实验的目的和要求

?每次实验前必须做好预习，明确本次实验的目的、内容、操作要点和相关的理论知识。

?进入实验室必须严格遵守实验室规则。

?实验中听从老师指导，依照三严（严肃、严格、严密）要求进行实验，做好实验记录。

?认真观察分析实验结果,写出实验报告。实验中遇到的有关问题,用科学的态度总结探讨其原因,培养分析问题和解决问题的能力。

实验室规则

?进入实验室必须穿好白大衣。

?除实验中必须的学习用品外，不要放实验台上。

?实验室内不允许吃食品、饮水，严禁吸烟。

?实验中一定要保持实验室安静，不要大声喧哗，严禁打闹。

?实验要按老师要求操作，如发现问题要及时报告指导老师。

?爱护实验器材，如有损坏应及时报告老师，需赔偿者按规定办理。

?实验完毕要清理台面，需冲洗者按要求冲洗，需收回者按要求摆放整齐收回。

?离开实验室时，一定要有专人负责关好门窗、水源及照明设备。

第一篇非特异性免疫检测

实验一血脑屏障作用

[基本原理]

血脑屏障由软脑膜、脉络丛的毛细血管壁和包在壁外的神经胶质细胞形成的胶质膜构成，起着天然的屏障作用，可以阻挡病原微生物及毒性产物、异物颗粒包括染料颗粒等从血流进入脑组织和脑脊液内，从而保护中枢神经系统免受损害。

[实验材料]

2只小鼠。1ml无菌注射器（配4号针头）。5%台盼蓝水溶液。

生理盐水0.1ml。眼科剪子和镊子等。

[实验方法]

?用1ml无菌注射器吸取5%台盼蓝水溶液经尾静脉注入两只小鼠体内，每只0.7ml，更换注射器，给其中一只小鼠颅内注射生理盐水0.1ml。

?5-10分钟后观察小鼠皮肤，尤其是眼、嘴的颜色变化。

?于30-60分钟，见小鼠眼、嘴呈现蓝色，即窒息死亡，腹部向下固定。

?由头到尾沿背中线剪开皮肤，暴露皮下、肌肉和内脏，观察颜色变化。

?小心剖开颅骨和椎骨，暴露脑和脊髓，与皮下、肌肉及内脏比较；并比较2只小鼠有何不同。

[实验结果]

未经颅内注射的小鼠，眼、耳、鼻皮下及肌肉均呈现明显的蓝色，但脑、脊髓均未变色；而经颅内注射的小鼠上述部位可呈现明显的蓝色。

[注意事项]

?台盼蓝水溶液要经过滤后方可使用。

?尾静脉注射要从远断进针；如推注容易，表明进入了血管；如引起皮下凸起或发白，说明未进入了血管；拔出针头，从稍近断进针。

（谢明）

实验二吞噬细胞的功能试验

巨噬细胞能吞噬鸡红细胞、中性粒细胞可吞噬多种细菌，如葡萄球菌等。将巨噬细胞和中性粒细胞分别与鸡红细胞、表皮葡萄球菌混合，孵育一定时间后涂片染色镜检；见巨噬细胞可吞噬鸡红细胞；中性粒细胞可吞噬葡萄球菌，可计算出吞噬异物的细胞数和吞噬细胞中吞入的异物数。在巨噬细胞中亦可见到鸡红细胞发生形态改变。具此可判断两类吞噬细胞的吞噬功能和消化功能，用以评价机体的免疫状态。

[实验目的]

证实吞噬细胞的吞噬作用。了解机体的非特异免疫防护作用。

一、豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用測定（大吞