乙醇脱氢酶活性测定试剂盒说明书.docxVIP

货号：MS1007 规格：100管/96样

乙醇脱氢酶（ADH）活性测定试剂盒说明书

微量法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。

测定原理：

ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+，NADH在340nm处有吸收峰，而NAD+没有；测定340nm吸光度下降速率，来计算ADH活性。

自备实验用品及仪器：

研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体X1瓶，室温保存。

试剂二：液体X1瓶，4°C保存。临用前把试剂三转移到试剂二中，4°C保存。

试剂三：粉剂X1支，一20C保存。

试剂四：液体X1支，4C保存。

粗酶液提取：

1、 组织：按照组织质量（g）:试剂一体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4C离心20min，取上清置冰上待测。

2、 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入血1试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w