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DNAstar软软件件的的使使⽤⽤((1))Megalign序序列列⽐⽐对对_唐唐明明智智_新新
浪浪博博客客
DNAstar软件共有七个⼩程序(见下图),各⾃执不同的功能,Editseq⽤于序列编辑,Seqman可以去除载体序列和拼接序
列,MegAlign
则主要执序列⽐对的功能.
开启MegAlign软件⾸先需要点击FileNew新建⼀个⼯作⽂件
再点击FileEntersequeces添加需要⽐对的序列,⽀持多种格式的⽂件(.seq;.abi;.pro;.fas等),点Add可添加多个⽂件,
点Done
导⼊选中的⽂件.
这是⽂件导⼊后的界⾯
点Align选择序列⽐对的算法,其中多序列⽐对有三种算法:TeJotunHeinmetod,ClustalV和ClustalW;⼀般选择
ClustalW即可。三种算法的差异如下:
“TeJotunHeinmetodwasdevisedtoalignsequencestatarepreviouslyknowntoberelatedbydescent.TeClust
ClustalWisanadvancementoverClustalV,andwasdesignedtocreatemoreaccuratealignmentsforiglydivergedsequ
“CLUSTALW是⼀种渐进的多序列⽐对⽅法,先将多个序列两两⽐对构建距离矩阵,反应序列之间两两关系;然后根据距离矩
阵计算产⽣系
统进化指导树,对关系密切的序列进加权;然后从最紧密的两条序列开始,逐步引⼊临近的序列并不断重新构建⽐对,直
到所有序列
都被加⼊为⽌”。
红⾊区域表⽰的是相似性最⾼的区域,蓝⾊和绿⾊是同源性较低的区域;
多序列⽐对的⼀个缺点就是不会⾃动对序列反向互补后再⽐对,所以反向互补后同源性⾼的序列检测不出来。如下图中的
20.p0和20.p6其
实是同⼀模板的两个⽅向的测序结果,像这种需要⽤到两两⽐对(Onepair)。
OnePair也有好⼏种算法,任选⼀种都可,有兴趣的可以⾃⼰查找⼀下差别;
OnePair⽐对时需要先选中将要⽐对的两个序列
这是⽐对后的默认结果,不太容易分辨,
在序列上点右键,选择Alinmentcoloor设置显⽰参数,⼀般全选即可,这样可得到很直观的结果,最上⾯⼀栏显⽰相似性的
⼀些信息。
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