血清学检验及其新技术.ppt

CompanyLogo免疫血清学实验-中和试验临床免疫学检验抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验称为中和试验。主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、不同病毒株的抗原关系研究、疫苗免疫原性的评价、免疫血清的质量评价和检测动物血清中的抗体等。第58页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验-中和试验临床免疫学检验终点法中和试验(endpointneutralizationtest)固定病毒稀释血清法：测定病毒毒价；固定病毒稀释血清接种细胞或动物，计算中和价固定血清稀释病毒法：固定血清稀释病毒接种细胞或动物，计算LD50，然后计算中和指数（中和组LD50/对照组LD50）第59页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验-中和试验临床免疫学检验空斑减少试验(plaguereductiontest)：空斑数减少50％的血清量作为中和滴度病毒稀释成每一接种剂量含100PFU，加倍比稀释的血清，37℃1h接种细胞加入预温的营养琼脂计算空斑数第60页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验-其他检测技术临床免疫学检验免疫转印技术（immunoblotting）免疫沉淀（immunoprecipitation）化学发光免疫测定（chemiluminescentimmunoassay，CLIA）胶体金免疫检测技术第61页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验-沉淀试验临床免疫学检验间接血凝试验将抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体，在与相应抗体反应时出现肉眼可见凝集，称为间接血凝试验(passiveheamagglutinationassay,PHA)将抗体致敏于红细胞表面，用以检测检样本中相应抗原，致敏红细胞在与相应抗原反应时发生凝集，称为反向间接血凝试验(reversepassiveheamagglutinationassay,RPHA)。第62页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验临床免疫学检验一、凝聚性试验凝集试验：由颗粒性抗原参与沉淀试验：由可溶性抗原参与第63页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验临床免疫学检验一、凝聚性试验凝集试验：由颗粒性抗原参与沉淀试验：由可溶性抗原参与第64页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo免疫血清学实验临床免疫学检验一、凝聚性试验凝集试验：由颗粒性抗原参与沉淀试验：由可溶性抗原参与第65页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo1、总补体和单个成分的测定临床免疫学检验血清总补体溶血活性（CH50）测定50％溶血法：50～100U／ml脂质体法：26～55lU／ml目视比色法第66页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo1、总补体和单个成分的测定临床免疫学检验[临床意义]补体是机体免疫防御系统的重要组成部分，其主要功能是抗感染，同时也有引起炎症的作用，参与变态反应。总补体活性测定，主要是反映补体(C1～C9)经传统途径活化的活性。等。第67页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo1、总补体和单个成分的测定临床免疫学检验总补体活性升高：见于各种急性炎症、感染、组织损伤、恶性肿瘤等，一些传染病，如风湿热、伤寒、结核、麻疹等也可见补体代偿性升高总补体活性降低，可能有以下几种原因：(1)补体消耗增多：常见于血清病、急性肾小球肾炎、慢性肾炎、SLE活动期、恶性类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血等。(2)补体大量丧失：多见于肾病综合征乃大面积烙伤等情况；。(3)补体合成不足：主要见于各种肝病患者，如肝硬化、慢性活动性肝炎及急性重症肝炎第68页，讲稿共104页，2023年5月2日，星期三CompanyLogo1、总补体和单个成分的测定临床免疫学检验常作为单个补体成分的检测指标：C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等。测定方法：免疫溶血法（检测单个补体成分的活性）免疫化学法（检测单个补体成分的含量）自动化免疫散射比浊法第69页，讲稿共104页，2