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胸导管淋巴液对重症急性胰腺炎并发肺损伤影响的实验研究的开题报告

背景与意义：

重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis，SAP）是一种病死率较高的急腹症，其发病机制至今不为完全明确。近年来，研究发现SAP患者不仅存在胰腺局部炎症，同时还可出现肺部损伤，如ARDS、肺炎等，并成为SAP的重要死因之一。胸导管淋巴液是一种起居调节、营养代谢和免疫防御的液体，其中富含大量淋巴细胞，如CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞等，以及许多细胞因子，如IL-2、IL-4、IFN-γ等，它在机体免疫反应中发挥着重要的作用。临床上发现，SAP患者胸导管淋巴液淤积增多，提示在SAP的发病和发展中胸导管淋巴液可能有一定的作用。然而目前对于胸导管淋巴液和SAP患者肺损伤的关系研究还很少。

目的：

本研究旨在探讨胸导管淋巴液对于SAP患者肺损伤的影响及其机制。

方法：

1.建立SAP模型：选择健康的SD大鼠随机分组，采用胰腺反弹法建立SAP模型，造模方法：将大鼠术中分离出胰腺，远端灌注(Na2EDTA5mmol/L)后静置20min，然后静脉注射丙酮酸（2.88g/kg）。

2.取样：在SAP模型制备成功后，随时刻0、6、12、24、48、72h以及术后第7天、第14天、第28天，分别取SAP大鼠的胸导管淋巴液、血清和肺组织，采用基因、蛋白和细胞水平各种实验方法进行分析。在实验过程中还设置对照组和胸导管淋巴液外流组。

3.实验分析：使用酶联免疫吸附法分析胸导管淋巴液和血清中白细胞、T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)和细胞因子(IL-2、IFN-γ、TNF-α)的水平。采用西方印迹法进行炎症反应相关基因(NF-κB、TNF-α、IL-6、ICAM-1、E-selectin)和胶原分解酶(MMP-9、MMP-2)的检测。采用光镜和电镜观察肺组织发生的病变和对胸导管淋巴液的影响。

预期结果：

本实验拟通过对胸导管淋巴液和SAP患者肺损伤的研究，探索胸导管淋巴液在SAP发病和发展中的作用，揭示其可能的机制。预计可以发现胸导管淋巴液可以在一定程度上预防或减轻SAP患者的肺部损伤，为SAP的临床诊断和治疗提供新的理论支持。