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色谱分析中的选择性的控制——Comix混合作用色谱柱介绍和方法开发精要
主要内容什么是混合作用色谱?什么时候需要用到混合作用色谱?Comix系列混合作用色谱柱的固定相设计及保留机理Comix系列色谱柱方法开发的色谱柱选择和流动相设计案例分析混合作用色谱柱的使用注意事项
什么是混合作用色谱?WhatisMixed-modeChromatography?Westandco-workersdefinedthetermasthecombineduseoftwo(ormore)retentionmechanismsinasinglechromatographicsystem.-C.West,etal.,LCGCNorthAm.30(6s),22–33(2017).Gilarandco-workersfurtherdefinethetermastheuseofmultipledominantretentionmechanisms.-Z.Kadlecova?,etal.,J.Chromatogr.A1625,461301(2020).InChromatography,LikeinLife,?AllInteractionsMatter.-by某位混合作用色谱固定相设计和方法开发大师
什么是混合作用色谱?常用的混合作用组合:混合作用分配作用离子作用疏水作用(RPC)亲水作用(HILIC)离子交换(IonExchange)离子排斥(IonExclusion)常用的部分混合作用色谱柱设计:
什么情况下需要用到混合作用色谱?2.当分析大极性有机小分子,但不能或者不想使用离子对试剂时;1.当我们需要定量分析无机离子,但是没有配备离子色谱仪时;3.当需要同时保留和分离性质差异大的多个化合物(如强疏水,强亲水等)时;4.当遇到一些带强电荷基团(如季铵基)的化合物,用C18类色谱柱时峰形难以改善时;……
Comix系列混合作用色谱柱的固定相设计及保留机理ComixshellAIRPComixshellCARPComixsilACRPComixsilRPACComixsilRP-AXComixsilRP-CXComixsilHCSComixsilRP-100……Comix系列固定相:
Comix系列混合作用色谱柱的固定相设计及保留机理ComixshellAIRPComixshellCARPComixsilRPACComixsilRP-AXComixsilRP-CXComixsilRP-100RP+IONEXCHANGE/EXCLUSION可提供的作用模式可提供的作用模式疏水作用阳离子交换阴离子排阻疏水作用阴离子交换阳离子排阻疏水作用阳离子交换阴离子排阻疏水作用阳离子交换/排阻阴离子交换/排阻疏水作用阴离子交换阳离子排阻疏水作用阳离子交换阴离子排阻
Comix系列混合作用色谱柱的固定相设计及保留机理ComixsilACRPComixsilHCSHILIC+IONEXCHANGE/EXCLUSION可提供的作用模式可提供的作用模式HILIC作用阳离子交换阴离子排阻HILIC作用阴离子交换/排阻阳离子交换/排阻
Comix系列色谱柱方法开发的色谱柱选择和流动相设计色谱柱选择的基本原则:选择的色谱柱可以和分析物有一种强的作用力,另一种弱的或者中等的作用力;避免固定相与分析物存在两种强的作用力,以免保留过强,需要过高浓度的缓冲盐的流动相,同时很可能会导致峰形问题;流动相选择的基本原则:根据化合物和所选择的固定相,选择合理的pH、缓冲盐浓度和有机相比例,保证色谱柱与分析物之间存在强/中强和强/弱混合作用的。
Comix系列色谱柱方法开发的色谱柱选择和流动相设计认识化合物以及了解其可能的作用:
Comix系列色谱柱方法开发的色谱柱选择和流动相设计反相作用:有机相越低作用越强;HILIC作用:当有机相70%时才比较明显,有机相越高HILIC保留越强;离子交换作用:当分析物上的基团与固定相上的基团所带电荷相反时,就存在离子交换作用;可以通过调节pH值改变固定相和分析物上弱酸基团的电离程度,从而改变离子交换强度;同时可以通过改变缓冲剂的浓度和有机相浓度来调节离子强度,离子强度大洗脱更强;离子排斥作用:当分析物上的基团与固定相上的基团所带电荷相同时,就存在离子排斥作用;可以通过调节pH值改变固定相和分析物上弱酸基团的电离程度,从而调节离子排斥作用;同时可以通过改变缓冲剂的浓度和有机相浓度来调节离子强度,离子强度大,排斥越小。流动相条件对各作用的影响:
案例分析(碘离子)(钠离子)HILIC+阴阳离子交换阴阳离子
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