微生物学第八章微生物与基因工程.pptVIP

宿主基本要求是：

①能够高效吸收外源DNA；

②具有使外源DNA进行高效复制的酶系统；

③不具有限制修饰系统，故不会使导入宿主细胞内未经修饰的外源DNA发生降解；

④一般为重组缺陷型（RecA-）菌株，使克隆载体DNA与宿主染色体DNA之间不发生同源重组；

⑤便于进行基因操作和筛选；

⑥具有安全性。第31页，讲稿共76页，2023年5月2日，星期三原核生物的大肠杆菌及真核生物的酿酒酵母，由于他们具有生长迅速、极易培养，能在廉价培养基上生长，遗传学和分子生物学背景十分清楚等突出优点，已成为当前被广泛应用的重要克隆载体宿主。另外还有枯草杆菌和昆虫细胞系等。第32页，讲稿共76页，2023年5月2日，星期三第二节基因工程的基本过程基因工程操作主要步骤为：①分离或合成基因（切），②通过体外重组将基因插入载体（接），③将重组DNA导入细胞（转），④扩增克隆基因（增），⑤筛选重组体克隆（检），⑥对克隆的基因进行鉴定或测序，⑦控制外源基因的表达，⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物、工程菌（利用基因工程技术获得的具有新功能的微生物称为工程菌）。第33页，讲稿共76页，2023年5月2日，星期三第34页，讲稿共76页，2023年5月2日，星期三第35页，讲稿共76页，2023年5月2日，星期三一、目的基因的分离或合成1，从基因文库中筛选基因文库是指生