免疫检测技术的基本原理.pptVIP

酶联免疫吸附试验(ELISA-间接法)第30页，讲稿共86页，2023年5月2日，星期三包被固相载体:用已知抗原包被固相载体加待检标本:使相应抗体与固相抗原结合洗涤，除去无关的物质加酶标抗抗体:与固相载体上抗原抗体复合物结合；洗涤，除去未结合的酶标抗抗体加底物显色根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量测定第31页，讲稿共86页，2023年5月2日，星期三（三）竞争法此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可用于测定抗体。第32页，讲稿共86页，2023年5月2日，星期三用已知特异性抗体包被固相载体测定管加待测抗原和一定量的酶标抗原使二者与固相抗体竞争结合对照管只加一定量酶标抗原与固相抗体直接结合分别洗涤除去未结合的成分加底物显色分别测定两管的吸光度值，根据对照管与测定管吸光度值之比，计算标本中待测抗原含量第33页，讲稿共86页，2023年5月2日，星期三对照管由于只加酶标抗原，与固相抗体充分结合，故分解底物显色深；测定管的显色程度则随待测抗原和酶标抗原与固相抗体竞争结合的结果而异。如待测抗原量多，竞争性地抑制酶标抗原与固相抗体结合，使固相上结合的酶标抗原量减少。因此，加入底物后显色反应较弱。第34页，讲稿共86页，2023年5月2日，