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RNA干扰抑制生存素基因表达逆转肝癌耐药性的研究的开题报告

1.研究背景及意义

生存素（Survivin）是一种高度保守的细胞凋亡抑制蛋白，它在肿瘤发生和发展中起着重要作用。近年来的研究发现，生存素在肿瘤耐药性中也扮演着重要角色。然而，在肝癌中针对生存素进行治疗的临床研究进展缓慢，耐药性仍然是肝癌治疗的重要挑战。

RNA干扰技术（RNAinterference，RNAi）是通过专门设计的双链RNA（smallinterferingRNA，siRNA）对靶基因进行选择性抑制，从而抑制相应基因的表达。已有的研究表明，RNA干扰可以有效地抑制生存素的表达，从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖。然而，目前针对肝癌中生存素的RNA干扰研究还比较少，并且缺乏深入的机制研究。

因此，本研究旨在探讨RNA干扰抑制生存素基因表达逆转肝癌耐药性的机制，为肝癌的治疗提供新的治疗策略。

2.研究内容和方法

2.1研究内容

（1）构建生存素靶向siRNA；

（2）体外实验：评估RNA干扰对肝癌细胞增殖、细胞周期、凋亡和耐药性的影响；

（3）体内实验：建立肝癌耐药模型，评估RNA干扰对耐药性的逆转作用；

（4）探究RNA干扰抑制生存素逆转耐药性的可能机制。

2.2研究方法

（1）构建siRNA：采用生存素基因序列设计siRNA，并利用合成技术合成siRNA；

（2）细胞实验：从帕金森（HepG2）和肝癌细胞株中分离出细胞，对RNA干扰后细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡进行测定，并评估RNA干扰对癌细胞的耐药性的影响；

（3）动物实验：选用小鼠进行实验，建立肝癌耐药模型，并将小鼠随机分为RNA干扰组、模型组以及对照组，通过体内实验评估RNA干扰的逆转作用；

（4）分子实验：采用Westernblot和PCR等方法探究RNA干扰抑制生存素逆转耐药性的可能机制。

3.预期结果及意义

通过本研究，预期可以构建出生存素靶向siRNA，通过实验验证RNA干扰能够有效抑制生存素表达并逆转肝癌细胞的耐药性。同时，针对RNA干扰抑制生存素逆转耐药性的机制进行深入研究，有望为肝癌治疗提供新的治疗策略，并为RNA干扰技术提供新的理论指导。