人工miR159介导的番茄抗黄瓜花叶病毒遗传转化研究的开题报告.docxVIP

人工miR159介导的番茄抗黄瓜花叶病毒遗传转化研究的开题报告

研究背景

黄瓜花叶病毒（Cucumbermosaicvirus，CMV）是全球性的重要病毒病害，在温室和田间作物中均有高发病率。番茄是鲜食和加工用途广泛的重要蔬菜作物，然而番茄也是CMV的重要寄主，常常受到CMV的侵害。传统的控制方法包括药剂防治和培育抗性品种，但这些方法都存在各种限制和不足。因此，开展基因工程研究来提高番茄对CMV的抗性具有重要意义。

研究内容

本课题选取了一个重要的差异表达miRNA基因miR159，通过基因工程技术将其引入番茄基因组中，并研究其对番茄抗CMV性的影响。具体内容包括：

1.构建人工合成的miR159基因片段和植物表达载体pCAMBIA1301之间的克隆和连接工作。

2.将表达miR159的转化体和野生型番茄分别接种CMV，并观察其病毒感染后的表型变化，比较差异。

3.利用RT-qPCR技术检测miR159作用下游的靶基因表达情况，探究miR159介导的抗CMV机制。

4.利用稳定转化的番茄品种，进行大田试验，验证人工miR159的应用效果。

研究意义

本研究的目的是探究人工miR159介导的抗病机制，为番茄抗CMV育种提供新的思路和策略。成功地将miR159引入番茄基因组中，实现了对miRNA的功能研究和应用。通过本研究，为利用基因工程手段提高番茄抗病能力开辟了新的方向。同时，本研究可为果蔬产品产业提供技术支持和解决方案，促进蔬菜生产的可持续发展。