生物1.2《基因工程的基本操作程序》课件1(新人教版选).pptxVIP

生物1.2《基因工程的基本操作程序》课件1(新人教版选)

目录contents基因工程简介基因工程的工具和技术基因工程的基本操作程序基因工程的安全性及伦理问题案例分析

基因工程简介01

0102基因工程的定义基因工程是现代生物技术的重要组成部分，广泛应用于农业、医药、工业等领域。基因工程是指通过人工操作将外源基因导入受体细胞，并实现基因表达和产物分离的技术。

随着技术的不断发展和完善，基因工程在80年代和90年代取得了突破性进展，并逐渐应用于实际生产中。当前，基因工程技术已经成为了现代生物技术领域的重要支柱，为人类带来了巨大的经济和社会效益。基因工程的起源可以追溯到20世纪70年代，当时科学家开始尝试通过人工方法将外源基因导入细胞。基因工程的历史与发展

基因工程的应用农业领域基因工程在农业上主要用于改良作物的品质、抗逆性和产量等方面，如抗虫、抗病、抗旱等转基因作物。医药领域基因工程在医药领域主要用于药物研发、基因治疗和疫苗生产等方面，如利用基因工程技术生产重组蛋白药物和单克隆抗体等。工业领域基因工程在工业上主要用于生物催化、生物材料和生物能源等方面，如利用基因工程技术生产生物塑料和生物燃料等。

基因工程的工具和技术02

是一种能够识别并切割DNA特异序列的酶，是基因工程中常用的工具酶之一。限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶能够识别并切割DNA的特异序列，通常为4-6个核苷酸。识别序列限制性核酸内切酶在识别序列的内部进行切割，产生具有黏性末端的DNA片段。切割方式不同的限制性核酸内切酶具有不同的识别序列和切割位点，因此可以用于构建不同的基因工程载体。酶切位点限制性核酸内切酶

是一种能够连接两个DNA片段的酶，是基因工程中常用的工具酶之一。DNA连接酶连接方式连接条件连接效率DNA连接酶能够将两个DNA片段的黏性末端连接起来，形成新的DNA分子。DNA连接酶需要在特定的缓冲液和温度条件下进行连接反应。DNA连接酶的连接效率受到DNA片段的长度、黏性末端的互补程度以及连接条件的影响。DNA连接酶

聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外快速扩增特定DNA片段的方法，是基因工程中常用的技术之一。扩增条件PCR扩增需要特定的缓冲液和耐热的DNA聚合酶，以及一对特定的引物。扩增产物PCR扩增产物通常为数百万倍的DNA片段，可用于后续的分子生物学实验和分析。扩增原理PCR利用耐热的DNA聚合酶，通过在特定条件下循环进行高温变性、低温复性和适温延伸三个步骤，实现DNA片段的快速扩增。聚合酶链式反应（PCR）

电泳技术是一种利用电场对带电粒子进行分离的方法，是基因工程中常用的技术之一。工作原理电泳技术利用不同带电粒子在电场中的迁移率不同，从而实现分离和纯化。在基因工程中，常用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对DNA和蛋白质进行分离和纯化。应用范围电泳技术广泛应用于基因工程中的分子生物学实验，如DNA片段大小分析和蛋白质分离纯化等。电泳技术

基因工程的基本操作程序03

从基因文库中获取目的基因，适用于已知目的基因序列的情况。基因文库法通过化学合成法合成目的基因，适用于目的基因序列已知且合成片段较小的情况。化学合成法利用PCR技术扩增目的基因，适用于目的基因片段较小且序列已知的情况。聚合酶链式反应（PCR）法通过转录组测序获得目的基因，适用于目的基因未知或需要筛选特定基因的情况。转录组测序法目的基因的获取

使用限制性内切酶切割目的基因和载体DNA，获得具有黏性末端的DNA片段。限制性内切酶切割将切割后的目的基因和载体DNA片段用T4DNA连接酶连接，形成重组DNA分子。T4DNA连接酶连接通过电泳检测重组DNA分子是否形成以及大小是否正确。电泳检测将重组DNA分子导入大肠杆菌感受态细胞中，进行扩增和筛选。转化大肠杆菌基因的体外重组

感受态细胞制备将受体细胞培养至对数生长期，通过化学或物理方法制备感受态细胞。重组DNA导入受体细胞将重组DNA分子与感受态细胞混合，通过电转或热激法将重组DNA导入受体细胞。筛选阳性克隆通过抗性筛选或蓝白筛选等方法筛选含有目的基因的阳性克隆。鉴定阳性克隆通过PCR、酶切和测序等方法鉴定阳性克隆是否含有目的基因。重组DNA导入受体细胞

重组体的筛选与鉴定抗性筛选通过抗生素抗性或其他抗性筛选含有目的基因的克隆。蓝白筛选利用载体上标记的β-半乳糖苷酶基因表达产物分解X-gal产生的蓝色菌落进行筛选。Southern印迹杂交通过Southern印迹杂交技术检测克隆中目的基因的存在和整合位点。Northern印迹杂交通过Northern印迹杂交技术检测目的基因的表达水平。

基因工程的安全性及伦理问题04

基因工程过程中，由于对基因的操作可能引发意外的基因突变，这些突变可能对生物体产生不良影响。基因突变风险基因工程可能导致生