蛋白质修饰表达.pptVIP

第三章蛋白质的修饰和表达重点：蛋白质的分子生物学改造重组蛋白的表达难点：蛋白质的分子生物学改造

蛋白修饰的途径化学途径分子生物学途径

蛋白质的化学修饰：通过活性基团的引入或去除使蛋白质化学(一级)结构发生改变的过程。非必需部分的修饰：不影响蛋白质的生物活性。必需部分的修饰：影响蛋白质的生物活性。第一节蛋白质的化学修饰

一、蛋白质侧链基团的化学修饰蛋白质化学修饰的主要部位是蛋白质的侧链基团。蛋白质侧链基团的化学修饰是通过选择性试剂或亲和标记试剂与蛋白质分子侧链上特定的功能基团发生化学反应而实现的。巯基、氨基和羧基特别容易产生有用的取代。

（一）巯基的化学修饰N-乙基马来酰亚胺是一种有效的巯基修饰试剂，该反应具有较强的专一性并伴随光吸收的变化，可以很容易通过光吸收的变化确定反应的程度。N-马来酰亚胺自旋标记物可以作为自旋探针来研究蛋白质分子构象变化。

（二）氨基的化学修饰三硝基苯磺酸能够与赖氨酸残基的ε-氨基发生反应形成一种三硝基苯基化的氨基磺酸复合物，该复合物呈黄色，在420nm下有最大吸收峰。

（三）羧基的化学修饰蛋白质分子中的羧基可以通过碳二亚胺法、混合酸酐法等与氨基形成酰胺键，其中水溶性碳二亚胺法在这类化合物的偶联反应中的