Westernblot试剂配制及操作步骤.docVIP

(完整word版)Westernblot试剂配制及操作步骤

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Westernblot

试剂配制

30%丙稀酰胺储存液

丙稀酰胺29g

N，N-亚甲双丙稀酰胺1g

双蒸水定容到100ml，

经高压蒸汽灭菌的滤纸过滤避光，4℃

2．1。5MTris-HCl（MW=121。1） pH8。8

Tris碱 90.75g

双蒸水 400ml

用浓HCl调pH至8.8，加双蒸水定容至500ml。4℃

3．1.0MTrispH6.8

Tris碱 12g

双蒸水 60ml

用浓HCl调pH至6.8，

加双蒸水定容至100ml。4℃

4．10％SDS（w/v)

SDS10g

溶于加水至100ml,室温放置

5．10％过硫酸胺（10％APS）

过硫酸胺1g

溶于10ml双蒸水中。可在密闭的管子里4℃

6．10×Tris—甘氨酸电泳缓冲液

Tris30。3g

甘氨酸144g

SDS10g

定容至1000ml室温放置。