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第三章
发酵液预处理;第二页;目的;第一节发酵液的预处理;改善发酵液过滤特性的物理化学方法:
调酸(等电点)、热处理、电解质处理、添加凝聚剂、添加表面活性物质、添加反应剂、冷冻-解冻及添加助滤剂等。;1.降低液体粘度
2.调整pH
3.凝聚与絮凝;凝聚——指在电解质作用下,由于胶粒之间双电层电排斥作用降低,电位下降,而使胶体体系不稳定的现象;
絮凝——指在某些高分子絮凝剂存在下,基于桥架作用,使胶粒形成较大絮凝团的过程。;阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力的次序为:;采用絮凝法可形成粗大的絮凝体,使发酵液较易分离。
絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物,其相对分子质量可高达数万至一千万以上,长链状结构,其链节上含有许多活性官能团,包括带电荷的阴离子(如---COOH)或阳离子(如---NH2)基团以及不带电荷的非离子型基团。
它们通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。
当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上,产生桥架联结时,就形成了较大的絮团,这就是絮凝作用。;高分子絮凝剂的吸附和絮凝作用示意图;1)有机高分子聚合物,如聚丙烯酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物;
2)无机高分子聚合物,如聚合铝盐、聚合铁盐等;
3)天然有机高分子絮凝剂,如聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖、脱乙酰壳多糖等。;聚丙烯酰胺絮凝剂;聚丙烯酰胺类絮凝剂的优点;影响絮凝的因素;对于带负电荷的菌体或蛋白质来说,采用阳离子型高分子絮凝剂同时具有降低胶粒双电层电位和产生吸附桥架的双重机理;
对于非离子型和阴离子型高分子絮凝剂,要采用凝聚和絮凝双重机理才能提高过滤效果,这种包括凝聚和絮凝机理的过程,称为混凝。;4.加入助滤剂
5.加入反应剂;发酵液中的杂质;(一)、高价无机离子的去除方法;(二)杂蛋白的去除方法;在酸性溶液中,蛋白质与一些阴离子,如三氯乙酸盐、水杨酸盐、钨酸盐、苦味酸盐、鞣酸盐、过氯酸盐等形成沉淀;
在碱性溶液中,蛋白质与一些阳离子,如Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+??Pb2+等形成沉淀。;2.变性法;加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。
在四环素类抗生素中,采用黄血盐和硫酸锌的协同作用生成亚铁氰化锌钾的胶状沉淀来吸附蛋白质;
在枯草杆菌发酵液中,加入氯化钙和磷酸氢二钠,两者生成庞大的凝胶,把蛋白质、菌体及其他不溶性粒子吸附并包裹在其中除去。;在常规过滤或膜过滤时,易使过滤介质堵塞或受污染,影响过滤效率。
如发酵液中含有不溶性多糖物质,用酶将其转化为单糖,以提高过滤速率。
适合于固体含量1-10%的悬浮液的分离。
性质不稳定,随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解等作用的影响。
细菌和酵母菌为单细胞,体形较小,其发酵液采用高速离心分离,如对发酵液进行预处理,也可用过滤进行固液分离。
滤饼在框内两侧生成并增长,滤液通过滤布流到滤板板面的凹槽后因板面凹槽有暗孔与2、4通道相连或与3通道相连,故滤液可由三条通道流到过滤机外。
通气,产生气泡,使固体附着在气泡表面除去。
一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。
使用硅藻土时,通常细粒用量为500g/m3;
加入反应剂和某些可溶性盐类发生反应生成不溶性沉淀,如CaSO4,AlPO4等。
过滤介质为硅藻土、砂、颗粒活性炭、玻璃珠、塑料颗粒等,当悬浮液通过滤层时,固体颗粒被阻拦或吸附在滤层的颗粒上,使滤液得以澄清,适合于固体含量少于0.
分为洗涤板和非洗涤板两种。
过滤介质为滤布,包括天然或合成纤维织布、金属织布、玻璃纤维纸、合成纤维等无纺布。
第三章
发酵液预处理
它们通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。;重力沉降
浮选
旋液分离
过滤
离心;优点:分离速度快,分离效率高、液相澄清度好;
缺点:设备投资高、能耗大。
离心机种类:碟片式离心机、管式离心机、倾析式离心机。;碟片式离心机
是传统离心机,为目前工业上应用最广泛的离心机。分离因数可达1000-20000,最大处理量达到300m3/h,常用于大规模的分离过程。
适用范围
细菌、酵母菌、放线菌、细胞碎片;第二十七页;管式离心机
管式离心机是一种分离效率很高的离心分离设备,其转鼓细长,可在15000-50000的高转速下工作,分离因数可达104-6×105。它设备简单、操作稳定。
适用范围
细胞、细胞碎片、细胞器、病毒、蛋白质、核酸等。特别适合一般分离机难以分离的固形物含量1%发酵液的分离。
;第二十九页;管式离心机工作原理图;GF型,用于分离各种乳浊液,特别适用于二相相对密度差甚微的液一液分离以及
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