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蛋⽩质电泳操作步骤

SDS电泳操作步骤：

试剂配制：

（实验中采⽤均为分析纯）

（1）丙烯酰胺贮液（4℃下棕⾊瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）

丙烯酰胺贮液（T=30%，C=3%）

称取29.1g丙烯酰胺和0.9g甲叉双丙烯酰胺，⽤双蒸⽔溶解，定容⾄100ml，过滤备⽤。(试剂有毒，操作中注意防护)

（2）浓缩胶缓冲液（1mol/LTris-HCl，pH6.8）（4℃下棕⾊瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）

6.06gTris溶解于35ml双蒸⽔中，⽤浓盐酸调节pH⾄6.8，再⽤双蒸⽔定容⾄50ml。

（3）分离胶缓冲液（1.5mol/LTris-HCl，pH8.8）（4℃下棕⾊瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）

18.16gTris溶解于75ml双蒸⽔中，⽤浓盐酸调节pH⾄8.8，再⽤双蒸⽔定容⾄100ml。

（4）10%SDS

（5）10%过硫酸铵（APS）：使⽤前新鲜配制，低浓度APS⼀般当天⽤当天配制，勿过夜使⽤。(催化作⽤）

（6）尿素

（7）TEMED(N，N，N’，N’-四甲基⼄⼆胺)

（8）电极缓冲液(1×)（棕⾊瓶中4℃储存，⼀般使⽤3-4次）

0.025mol/LTris，0.192mol/L⽢氨酸，0.1%SDS，pH8.3

（9）电极缓冲液(2×)（棕⾊瓶