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产黄酮银杏内生菌的分离、纯化与液态培养的综述报告

银杏(Ginkgobiloba)是一种重要的中药材和观赏植物，含有丰富的多酚类、黄酮类、二萜类等活性成分，具有广泛的药理作用。银杏内生菌是指在银杏植株内生活的微生物，对植物的生长和发育具有重要影响。其中产黄酮的内生菌因其生物学特性和医学价值备受关注。

一、产黄酮银杏内生菌的分离及鉴定

1.分离方法

目前，分离出银杏内生菌的方法主要有两种：表面消毒法和均匀分割法。表面消毒法将银杏种子表面清洗消毒后，在肉汁-琼脂培养基上进行培养，待分离出菌落后进行筛选；均匀分割法将银杏幼苗的根茎进行均匀分割后，培养在含有5%的苹果源、5%的蔗糖和0.5%的琼脂的液体培养基中，经过数代传代后筛选出产黄酮内生菌。

2.鉴定方法

银杏内生菌鉴定方法的主要指标是产黄酮能力。产黄酮内生菌可通过高效液相色谱法(HPLC)等方法进行鉴定。

二、产黄酮银杏内生菌的纯化

1.表面消毒法

表面消毒法得到的内生菌体积小，需要对其进行筛选和纯化。一般采用芽孢杆菌等杂菌抑制性物质进行筛选，进而用分离培养技术对选出的产黄酮内生菌进行纯化。该方法操作简单，但效率较低。

2.均匀分割法

均匀分割法得到的内生菌数量大且异质性较低，可选择目标菌进行筛选和保存。在筛选阶段，可采用薄层色谱法TLC进行初步分离，再通过反复重结晶等方法进行进一步纯化。

三、液态培养

1.培养基

银杏内生菌的液态培养一般采用5%苹果源、5%蔗糖和0.5%琼脂等培养基。该培养基易制备且含有黄酮前体物质，有利于细胞生长和黄酮合成。

2.培养条件

银杏内生菌的液态培养条件应充分考虑其生物学特性。一般来说，较适宜的条件是在28℃下以120转/分的摇床转速进行培养，培养周期为2至3天。

四、产黄酮银杏内生菌的应用

产黄酮银杏内生菌的应用主要有以下几个方面：

1.银杏黄酮的生产

产黄酮的银杏内生菌可以通过优化培养条件和发酵工艺，大量生产银杏黄酮，为制备银杏药材和化妆品提供原料。

2.改良银杏树苗生长

产黄酮内生菌可以促进银杏苗木的生长和发育，提高树木质量和利用率。

3.抗病防治

产黄酮的银杏内生菌具有一定的抗微生物和抗肿瘤活性，可用于抗病防治和药物研发。

总之，产黄酮的银杏内生菌研究具有重要的科学及经济价值。通过分离、纯化、液态培养等技术手段，可以大量生产黄酮，并广泛应用于医药和农业领域。