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牛支原体肺炎混合感染细菌学调查及多重PCR检测方法的建立的综述报告
牛支原体肺炎混合感染细菌学调查及多重PCR检测方法的建立的综述报告
摘要:
牛支原体肺炎是一种常见的呼吸道传染病,其病原菌为牛支原体Mycoplasmabovis。然而,在实际的感染过程中,常常出现混合感染的情况,牛支原体M.bovis与其他呼吸道病原菌共同存在,导致病情更为严重。因此,为了更好地了解牛支原体肺炎混合感染的情况,建立了多重PCR检测方法,以提高检测精度和便捷性,并为疾病的防治提供更有力的支持。
本文主要为大家介绍牛支原体肺炎混合感染的细菌学调查现状、多重PCR检测方法的建立及其应用,并探讨多重PCR检测方法的优缺点以及发展前景。
一、牛支原体肺炎混合感染的细菌学调查现状
牛支原体肺炎混合感染是牛支原体肺炎的常见临床表现之一,而混合感染中常见的病原菌包括巴氏杆菌Pasteurellamultocida、肺炎支原体Mycoplasmacalifornicum、化脓性副鼻腔炎链球菌Streptococcusspp.等。这些菌群均可单独引起牛或其它动物呼吸道感染,也可作为辅助因素参与牛支原体M.bovis感染的过程。
在对牛支原体肺炎混合感染的病原菌进行分离鉴定的实验中,研究者们通常使用了牛腹腔注射法、气管插管内注射法、支原体培养等方法。通过对病原菌的病理生理特性、形态学特征、生化特征、分子检测等方面进行分析,已经初步建立了牛支原体M.bovis和其他病原菌的分类检测体系。
二、多重PCR检测方法的建立及其应用
多重PCR检测方法是在普通PCR技术的基础上建立的,通过同时放置多个引物,扩增多个目的片段,可快速、准确地检测多个目标菌种。相比于普通PCR技术,多重PCR技术具有检出范围广、操作简便、经济实惠等优点。
多重PCR技术在牛支原体M.bovis与其他病原菌混合感染检测方面具有很大的研究价值。目前,已经建立了多种多重PCR技术,并于相关文献中予以报道。
其中,汪文龙等人(2012)建立了一种同时检测牛支原体M.bovis、巴氏杆菌和化脓性副鼻腔炎链球菌的多重PCR方法,该方法的灵敏度高、特异性好、操作简便。其引物设计基于病原菌16SrRNA、16S-23SrRNA间隔区、hlyA等基因序列,可以正确诊断单因素和混合因素感染。
三、多重PCR检测方法的优缺点及发展前景
多重PCR技术相对于传统PCR技术是一种更为高效、时效、节约成本的检测方法。其优点在于可以同时检测多个目标物,适用于大规模样本检测等场景;同时对于多种病原体的混合感染也具有较好的检测效果。由于该技术基于设计好的引物可以定量检测靶标物,有望减轻以往对标准品的需求,实现定量检测。另外,多重PCR技术还可以应用于微生物分类识别,对病原体的快速鉴定和研究等领域也具有重要意义。
不过,多重PCR技术仍然存在着一些问题。首先,设计多重引物需要考虑引物之间的相互影响,避免产生假阳性或假阴性结果;其次,由于多重PCR技术的操作较为复杂,需要了解PCR反应体系,需要求稳定和精度等方面相对高的要求,而普通PCR技术相对更容易操作,对实验人员的技术要求较低,且更加容易操作。
未来,随着PCR技术的不断发展,多重PCR技术在牛支原体肺炎混合感染的诊断和检测方面还会发挥更大的作用。同时,将多重PCR技术结合到微生物分析与鉴别技术中,将会为生物安全、新一代疫苗开发等领域带来更大的变革。
总结:
本文综述了牛支原体肺炎混合感染的细菌学调查现状,介绍了多重PCR检测方法的建立及其应用,并讨论了多重PCR技术的优缺点和未来发展方向。多重PCR技术在牛支原体肺炎混合感染的检测和诊断中具有很大的研究价值,在今后的研究中需要对其进行更加系统和深入地探讨。
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