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生物分离工程层析汇报人：AA2024-01-24

CATALOGUE目录层析技术概述吸附层析分配层析离子交换层析凝胶过滤层析层析技术应用实例与前景展望

01层析技术概述

层析技术是一种基于物质在固定相和流动相之间分配平衡原理的分离方法。通过物质在两相中的分配系数差异，实现物质的分离和纯化。定义层析技术利用物质在固定相（如吸附剂、凝胶、离子交换剂等）和流动相（如气体、液体等）之间的分配平衡，使混合物中各组分以不同的速度在固定相上移动，从而达到分离的目的。分配系数取决于物质的性质、固定相和流动相的性质以及操作条件等因素。原理层析技术定义与原理

根据固定相和流动相的性质和操作方式，层析技术可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析等。分类层析技术在生物分离工程领域具有广泛的应用，如蛋白质、酶、抗体、核酸等生物大分子的分离纯化；细胞器、病毒等亚细胞组分的分离；以及天然产物中活性成分的提取和分离等。应用领域层析技术分类及应用领域

发展历史层析技术自20世纪初诞生以来，经历了从简单的纸层析、薄层层析到高效液相色谱、超临界流体色谱等的发展历程。随着科技的进步，层析技术的分离效率、分辨率和自动化程度不断提高。现状目前，层析技术已成为生物分离工程领域最重要的分离方法之一。随着新材料、新技术和新方法的不断涌现，层析技术将继续向更高效率、更高分辨率和更自动化的方向发展。同时，层析技术与其他分离技术的联用也将成为未来研究的热点之一。层析技术发展历史与现状

02吸附层析

吸附剂类型及特性多孔性物质，表面积大，吸附力强，适用于非极性物质的分离。具有多种晶型，表面积和孔结构丰富，适用于不同极性物质的分离。具有高比表面积和丰富的微孔结构，适用于吸附非极性和弱极性物质。具有亲和性和选择性吸附能力，适用于分离极性物质和生物大分子。硅胶氧化铝活性炭聚酰胺

装柱上样洗脱收集与检测吸附层析操作过择合适的吸附剂和溶剂，将吸附剂装入层析柱中，并用溶剂平衡柱子。将待分离样品溶解在少量溶剂中，加到层析柱顶端。用适当的溶剂进行洗脱，将不同组分按极性大小依次洗脱下来。分段收集洗脱液，对各段进行定性和定量分析。

吸附剂的选择溶剂的选择洗脱条件的优化温度控制吸附层析实验条件优化根据待分离物质的性质选择合适的吸附剂类型和粒度。通过改变洗脱剂的极性、浓度、流速等条件优化分离效果。根据待分离物质的极性和溶解度选择合适的溶剂系统。保持恒定的实验温度，避免温度变化对分离效果的影响。

03分配层析

VS分配层析是一种基于物质在两种不相溶溶剂中的分配系数差异进行分离的技术。当混合物随流动相通过固定相时，各组分在两相间进行多次分配，由于分配系数的差异，各组分在固定相中的滞留程度不同，从而使各组分按一定顺序从固定相中流出。特点分配层析具有分离效果好、选择性强、操作简便等优点。同时，它适用于分离各类化合物，如脂溶性成分、水溶性成分、氨基酸、多肽、蛋白质等。原理分配层析原理及特点

后处理对收集到的各组分进行浓缩、干燥等处理，得到纯化的单一组分。收集分段收集洗脱液，并对各段洗脱液进行检测，合并相同组分。洗脱用流动相洗脱层析柱，使各组分按分配系数的差异依次流出。准备选择合适的固定相和流动相，将固定相装入层析柱中，并用流动相平衡柱子。上样将待分离的混合物溶解在少量流动相中，沿层析柱内壁缓慢加入。分配层析操作过程

分配层析实验条件优化洗脱条件的优化通过调整洗脱剂的种类、浓度、流速等条件，优化洗脱过程，提高分离效果。层析柱的装填层析柱的装填要均匀、紧密，避免出现气泡和裂缝，以保证层析过程的顺利进行。固定相和流动相的选择根据待分离物质的性质选择合适的固定相和流动相，以获得最佳的分离效果。温度控制保持恒定的实验温度，避免温度变化对分离效果的影响。检测方法的改进采用灵敏度高、准确性好的检测方法，提高实验结果的准确性和可靠性。

04离子交换层析

具有三维交联结构的高分子材料，带有可交换的离子基团，如磺酸基、羧酸基等。根据离子交换基团的性质，可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。离子交换树脂以纤维素为基体，通过化学反应引入可交换的离子基团。与离子交换树脂相比，离子交换纤维素的交换容量较低，但分辨率较高。离子交换纤维素一种具有离子选择性的薄膜，可使特定离子通过而阻止其他离子通过。根据膜的性质，可分为阳离子交换膜和阴离子交换膜。离子交换膜离子交换剂类型及特性

离子交换层析操作过程样品处理将待分离的样品进行适当处理，如稀释、过滤等，以去除杂质和颗粒物。层析柱装填选择合适的离子交换剂，将其装填到层析柱中，并用适当的溶液进行平衡。上样与洗脱将处理后的样品加入层析柱顶端，用适当的洗脱液进行洗脱。在洗脱过程中，不同离子因与离子交换剂的亲和力不同而实现分离。收集与检测收集洗脱液，并对收集的组分进行检测和分