《酵母各种杂交》课件.pptVIP

精选课件酵母单杂交步骤设计含目的基因（诱饵）和下游报告基因的质粒，将其转入酵母细胞中。将文库蛋白的编码基因片段与GAL4转录激活域融合表达的cDNA文库质粒转化入同一酵母细胞中。若文库蛋白与目的基因相互作用，可通过报告基因的表达将其筛选。酵母杂交技术2016-7相关知识：1、顺式作用元件：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，作用是参与基因表达的调控。2、反式作用因子（转录因子）：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。3、报告基因：是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因。4、cDNA文库：以mRNA为模板，反转录合成双链cDNA，各cDNA分子分别插入载体形成重组子，再导入宿主细胞克隆扩增。这些在重组体内的cDNA的集合即cDNA文库。基本原理真核生长转录因子含有两个结构上可以分开的、功能上也相互独立的结构域组成的结构域：转录激活结构域(AD)(activationdomain)DNA结合结构域(BD)(DNAbindingdomain)转录激活因子BD：识别DNA上特定序列，转录激活域定位调控基因的上游。AD：与转录复合体其他成分作用，从而启动所调节基因的转录。两个结