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抗菌抗病毒常用实验研究方法知识

抗菌抗病毒常用实验研究方法

细菌、病毒性疾病是目前国内外流行的主要传染病,尤其是近两年

来,由冠状病毒引起的SARS及由流感病毒引起的禽流感给动物及人类

带来的严重危害,是人所共知的由于各种疫苗的不断出现,虽然一些细

菌、病毒病已得到了有效的控制,但是其治疗尚无有效的解决方法因此

研制高效、低毒的新型中药抗菌、抗病毒制剂已成为巫待解决的问题。

1、常用的抗菌方法

1、1稀释法

1、1、1试管稀释法

培养基内抗生素的含量按几何级数稀释并接种适量的细菌，经孵

育后，观察能引起抑菌作用最低抗生素浓度，称最低抑菌浓度(MIC)为

该菌对药物的敏感度。稀释法所获得的结果比较准确，常被用作校正

其他方法的标准。如以下黄贝贝等的青钱柳抗菌作用的实验研究和黄

利权等的火绒草的抗菌活性研究的实验方法:

1、应用试管稀释法,测定青钱柳提取物对试验菌的抑菌效果,检验

不同浓度下青钱柳提取物对细菌、霉菌的抗菌作用。结果:青钱柳提取

物在体外对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有

较强的抗菌作用;而对大肠埃希氏菌、铜绿假单孢菌等革兰氏阴性菌的

抗菌作用不明显;对黄曲霉、烟曲霉等霉菌的抗菌作用不明显[1]。

2、采用试管稀释法,分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇

提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提

水溶部分等7种提取物对大肠杆菌C83882、大肠杆菌C8390

3、大肠杆菌C8391

4、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌NewbouldS-30

5、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度(MIC)

和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,火绒草醇提物及其石油醚部分

和乙酸乙酯部分对两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,其MIC为

0114mg/ml生药浓度,MBC为0127mg/ml生药浓度,而其它部分对

金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分

对3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC为2170

mg/ml生药浓度,MBC为2170mg/ml生药浓度,显示了较强的抗菌活

性[2]。

1、1、2肉汤稀释法

以水解酪蛋白(M-H)液体培养基将抗生素作不同浓度的稀释，然

后种入待检细菌，定量测定抗菌药物抑制或杀死该菌的最低抑菌浓度

(MIC)或最低杀菌浓度(MBC)。

如刘菁菁的研究蓝玉簪龙胆对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)

的体内外抗菌活性。蓝玉簪龙胆分别以乙醇、氯仿、正丁醇、蒸馏水

提取，得到极性不同的4部分产物，利用肉汤稀释法测定其对MRSA

和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的最低抑菌浓度(MIC);体内

实验部分:采用腹腔注射MRSA法建立小鼠感染模型，分别给予蓝玉

簪龙胆水提液高、中、低剂量，银黄胶囊治疗15d，并与模型对照组

比较，观察存活率。结果：体外实验:蓝玉簪龙胆各极性组分对MRSA

和MSSA菌株均有不同程度的抑菌作用，其中正丁醇组分抑菌作用最

强，其次为乙醇、水层组分;体内试验:除了蓝玉簪龙胆大剂量组，其

余各治疗组存活率均高于模型对照组，而蓝玉簪龙胆中剂量组存活率

最高。结论蓝玉簪龙胆对MRSA和MSSA均具有一定的抗菌作用，而

且敏感性差异无显著性;对MRSA感染小鼠有一定治疗作用[3]。胡景

玉等为了了解衡水地区大肠埃希菌的药

敏情况，采用肉汤稀释法18种抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）并

计算其MIC

50

和

MIC

90

。结果亚胺培南、哌拉西林、他唑巴坦和头孢哌酮、舒巴坦显示

良好的抗菌

作用，其MIC

50分别为0.5μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml；MIC

90

均为2μg/ml，

其他药物显示不同程度的耐药，且大肠埃希菌产ESBLs的检出率

较高。结论检出的大肠埃希菌存在多重耐药，仅对亚胺培南、哌拉西

林、他唑巴坦和头孢哌酮、舒巴坦普遍敏感[4]。KianbakhtS等通过

肉汤稀释法研究刺蒺藜不同部位（果、茎叶、根）的甲醇提取物对金

黄色葡萄球菌ATCC