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- 2024-03-02 发布于中国
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2023下呼吸道感染mNGS解读专家共识(完整版)
宏基因组二代测序(mNGS)是近年来兴起的基于核酸检测的微生物鉴定
技术,由于其非预设性、高通量等优点而得到广泛应用。下呼吸道感染
(LRTI)主要包括社区获得性肺炎(CAP)、医院获得性肺炎(HAP)、免疫
抑制宿主肺炎、慢性阻塞性肺疾病急性加重、支气管扩张症合并感染等类
型,临床表现多样,感染微生物种类复杂,感染和定植鉴别困难,加之
mNGS技术本身存在的局限性,mNGS诊断效力的发挥有赖于选择恰当
患者、采用适宜标本以及进行合理的解读。
01哪些情况需送检mNGS?
(1)免疫抑制宿主疑似发生LRTI且临床表现提示非CAP常见病原微
生物所致者;
(2)LRTI患者发病初期即出现需要使用血管活性药物的感染性休克、需要
有创机械通气的呼吸衰竭、多脏器功能不全等危及生命的状况时;LRTI经
规范经验性抗感染治疗48~72h后,感染症状仍持续加重或影像学快速
进展者;
(3)聚集性发病疑似具有传染性、但无法明确病原体的LRTI;有特殊病
史(如近期境外或野外旅游史)且经验性治疗无效,病情较为严重的LRTI;
临床考虑特殊病原体(如钩端螺旋体、嗜肺军团菌、鹦鹉热、衣原体等)感
染且病势迅疾或迁延者,常规培养困难或所在医疗机构无法提供可靠的传
统检测方案时;
(4)患者有LRTI症状或影像表现,经规范抗感染治疗后病灶吸收延迟、
病程迁延,需鉴别是否由非感染性疾病所致(如结缔组织疾病的肺部累及、
肺淋巴瘤等),可以在常规病原微生物检测、感染生物标志物、病理等相关
检查同时送检mNGS以帮助鉴别诊断。
02、哪些情况不建议送检mNGS?
(1)免疫功能健全宿主罹患LRTI(包括重症肺炎),经过规范的经验性抗
感染治疗病情已好转;
(2)LRTI已通过其他方法获得病原学结果,与临床特点相符,或针对性治
疗有效;
(3)无法获取优质标本。
03、mNGS标本类型有哪些?
在LRTI的病原微生物诊断中,可用于mNGS检测的标本包括痰(含诱
导痰)、气管吸引物、支气管肺泡灌洗液(BALF)、经支气管肺活检(TBLB)
标本、经支气管内超声(EBUS)活检标本、经皮肺穿刺活检标本、血液
等。
04、mNGS送检及保存要求
(1)下呼吸道标本:包括痰(含诱导痰)、BALF、肺炎旁胸腔积液等,原
则上应在采集后立即送检。若标本不能立即送检,标本采集时间与检测时
间间隔≤24h,可在2~8℃保存。若标本采集时间与检测时间间隔
24h,DNA测序标本保存时间≤2周时可储存在-20℃冰箱,保存
时间超过2周则需储存在-80℃冰箱;需要进行RNA测序的标本如
果保存时间24h,均应保存在-80℃冰箱。对于短期不做检测的液
体样本,冻存前应分装保存在冻存管(≥500μL/管)中。
(2)血标本:采集后4℃保存不超过8h,如果需要长期保存,分离血
浆后4℃可保存24h,长期保存于-80℃冰箱。
(3)组织标本:来自感染部位的穿刺或手术切除组织标本,应保存在无菌
生理盐水或者Hank′s液中,4℃保存不超过24h。如果需要长期保
存,小块组织可以不加保存液立即-80℃冻存,穿刺活检标本置于无菌
生理盐水-80℃冻存。
05、标本运输的要求
(1)24h内送抵实验室并开始检测,可考虑冰袋低温运输;
(2)24~72h内送抵应干冰运输,送抵后应立即进行标本前处理和核酸提
取。
需要进行去宿主核酸处理的标本保存和运输注意事项:除了上述注意事项
外,此类标本一般要尽量保证病原微生物完整性,避免碾磨或多次冻融。
06、哪些情况需要在DNA测序的同时送检RNA测序?
RNA病毒引起的LRTI通常有一定的季节性、流行性或地域性。建议检
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