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主要步骤:(1)涂片:直接在载玻片上制薄的涂面(2)晾干:让涂片自然晾干(3)固定:菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(4)染色:将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上,加复红染色1-2min。(5)水洗:用水洗去涂片上的染色液(6)干燥:将涂片放在空气中晾干(7)镜检:在涂片上加香柏油一滴,将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。第30页,课件共47页,创作于2023年2月杆菌第31页,课件共47页,创作于2023年2月革兰氏染色革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染采用的是结晶紫,复染采用的是番红。G+菌:细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,基本不含类脂,肽聚糖分子交联度较紧密,故经乙醇处理后,肽聚糖网孔因脱水而明显收缩,使壁的通透性降低保留着结晶紫-碘复合物,所以复染液番红不能进入,细胞显紫色。G-菌:细胞壁薄,肽聚糖含量低,类脂含量高,肽聚糖分子交松散,故经乙醇处理后,壁会出现较大的缝隙,细胞透性增大,结晶紫-碘复合物易被洗脱出来,再经番红复染后使细胞显红色。第32页,课件共47页,创作于2023年2月步骤:结果:阳性菌——紫色阴性菌——红色结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染涂片固定由丹麦医生HansChristianGram于1884年创立。革兰氏染色法(GramStain)第33页,课件共47页,创作于2023年2月Figure1-AGramstainofGram+Staphylococcuscells.Figure2-GramstainofGram-E.colicellsFigure第34页,课件共47页,创作于2023年2月
鞭毛染色鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01—0.02μm。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色。第35页,课件共47页,创作于2023年2月(1)选菌(用新培养的菌种为宜)(2)制片(3)染色(4)镜检主要步骤:第36页,课件共47页,创作于2023年2月第1页,课件共47页,创作于2023年2月一、细菌的形态结构二、细菌的观察方法三、显微镜的使用方法第2页,课件共47页,创作于2023年2月第一节细菌的大小与形态1.大小:个体微小,通常以微米(μm)为测量单位2.基本形态:有三种:球状、杆状、螺旋状,分别称为球菌、杆菌和螺形菌第3页,课件共47页,创作于2023年2月球菌螺型菌杆菌第4页,课件共47页,创作于2023年2月第5页,课件共47页,创作于2023年2月细胞壁(cellwall):细胞壁是位于细菌细胞膜外的一层坚韧而有弹性的膜状结构。功能(1)维持细菌固有外形,保护细菌不受外界低渗环境的破坏;
(2)与细胞膜共同完成胞内外的物质交换;
(3)决定细菌的抗原性。
(4)某些成分与致病性有关第6页,课件共47页,创作于2023年2月菌毛鞭毛核质DNA荚膜细胞壁细胞膜核糖体胞质颗粒细胞质中介体细菌的结构第7页,课件共47页,创作于2023年2月细菌细胞壁所特有成分
由多糖骨架、四肽侧链和交联桥3部分组成第8页,课件共47页,创作于2023年2月磷壁酸(techoicacid)革兰阳性菌特有成分,是由核糖醇或甘油残基经磷酸二酯键相互连接而成的多聚物。作用:(1)调节离子通过粘肽层,有保存和输送镁离子的作用;(2)为噬菌体的特异性受体;(3)与细菌的致病性有关;(4)具有抗原性可用于细菌的分型。第9页,课件共47页,创作于2023年2月第10页,课件共47页,创作于2023年2月外膜G-细菌在肽聚糖层外面还有三层结构脂蛋白:由脂质和蛋白质构成外膜脂质双层类脂A内毒素的毒性部分,无特异性脂多糖核心多糖有属或组的特异性寡糖重复单位由3-5个单糖组成,有种或型的特异性脂质双层是G-菌细胞壁的主要结构,占细胞壁干重的80%,结构类似细胞膜,为液态的脂质双层,又称外膜第11页,课件共47页,创作于2023年2月第12页,课件共47页,创作于2023年2月革兰阳性菌及革兰阴性菌细胞壁结构及意义的比较?细胞壁结构革兰阳性菌
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