免疫荧光组织化学技术—荧光素标记的抗体.pptxVIP

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免疫组化技术

免疫荧光组织化学技术

荧光素标记的抗体

免疫荧光组织化学技术

荧光素标记的抗体

一、抗体的标记

荧光素异硫氰酸荧光素和四甲基异硫氰酸罗丹明B均含有硫碳胺键(一NCS),在标记抗体时硫碳胺键与抗体蛋白的氨基(一NH2)结合,形成较为牢固和稳定的荧光素-蛋白质结合物(荧光抗体)。

免疫荧光组织化学技术

荧光素标记的抗体

一、抗体的标记

一个抗体免疫球蛋白分子可与3~8个分子的FITC结合,在临床病理诊断中,主要使用商品化的荧光抗体。

荧光素标记的抗体

二、标记抗体的类型

荧光素可以标记一抗,也有标记二抗,

商品化的荧光一抗的抗体标记荧光素主要是FITC,大都是用于肾脏和皮肤组织病理诊断的兔多克隆抗体。

标记一抗用于直接法

荧光素标记的抗体

二、标记抗体的类型

标记二抗抗体的荧光素有FITC和TRITC,所标记的二抗有抗鼠lg和抗兔Ig两种,与鼠源和兔源一抗配套使用。

荧光素标记二抗用于间接法

荧光素标记的抗体

利用两种荧光素FITC和TRITC发出两种不同颜色的荧光(黄绿色和橙红色),可配合使用进行免疫荧光双重染色。

讨论

荧光素标记抗体的类型及应用？