实验一凝集试验.pptVIP

第1页，课件共23页，创作于2023年2月免疫血清学反应的一般特点特异性与交叉性抗原和抗体的结合为弱能量的非共价健结合结合温度应在0℃~40℃范围内,pH在4～9范围内抗原抗体反应的阶段性第一阶段：无可见反应。第二阶段：可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合等。带现象：前带现象抗体过多；后带现象抗原过多实验一凝集反应第2页，课件共23页，创作于2023年2月抗原、抗体的比例适当第3页，课件共23页，创作于2023年2月抗原、抗体的比例与形成免疫复合物的大小前带现象后带现象第4页，课件共23页，创作于2023年2月免疫血清学反应的影响因素1.电解质2.温度3.酸碱度第5页，课件共23页，创作于2023年2月目的意义：熟悉玻板凝集试验和试管凝集试验的操作技术。掌握凝集反应中阴性和阳性结果的判定。第6页，课件共23页，创作于2023年2月基本原理：细菌等颗粒性抗原与特异性抗体结合后，在有电解质的情况下，会出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。直接凝集反应可分为玻片凝集与试管凝集。凝集试验是疾病诊断及体内抗体水平测定的常用方法。第7页，课件共23页，创作于2023年2月凝集试验可根据抗原的性质、反应的方式分为直接凝集试验(简称凝集试验)和间接凝集试验。凝集试验直接凝集试验间接凝集试验试管法玻片法间接凝集试验反向间接凝集试验分类:第8页，课件共23页，创作于2023年2月第9页，课件共23页，创作于2023年2月玻片法玻片法为一种定性试验。此法简便快速，适用于新分得细菌的鉴定或分型。也可用已知的诊断抗原悬液，检测待检血清中是否存在相应抗体。第10页，课件共23页，创作于2023年2月试管法为一种定量试验，用已知抗原以检测待测血清中是否存在相应抗体和测定该抗体的含量，以协助临床诊断或供流行病学调查。第11页，课件共23页，创作于2023年2月器材及试剂:抗原和血清：布氏杆菌凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清、阴性血清、待检血清生理盐水、玻片、试管、加液枪、接种环等。第12页，课件共23页，创作于2023年2月实验步骤:一、虎红平板凝集试验：1.材料准备1.1抗原、标准阳性血清、阴性血清。1.2受检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。1.3洁净的玻璃板，其上划分成4cm2的方格。1.4吸管或分装器，适于滴加0.03ml。1.5牙签或火柴杆，供搅拌用。第13页，课件共23页，创作于2023年2月2.操作方法2.1将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清0.03mL。2.2在受检血清旁滴加抗原0.03mL。2.3用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。2.4每次试验应设阴、阳性血清对照。第14页，课件共23页，创作于2023年2月3.判定3.1在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。3.2受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(十)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(一)。第15页，课件共23页，创作于2023年2月第16页，课件共23页，创作于2023年2月玻板凝集与试管凝集的关系玻板凝集80μl40μl20μl10μl相当于试管凝集1：251：501：1001：200第17页，课件共23页，创作于2023年2月