血样采集SOP(操作规程).doc

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操作指引#

静脉血液样品采集标准操作程序

1.目的

抽取静脉血液样品以做各项检验。

2.适用范围

适用于一般的生化检测、免疫检测和分子生物检测等项目所需血液样品的采集。

3.物品准备

负压真空采血管（数量和种类根据要求选取，严格检查灭菌日期、有效期及有无漏气）、一次性采血针（数量和型号根据要求选取）、试管架、记号笔、一次性乳胶手套、口罩、帽子、防护服（实验服）、微量移液器（数量和种类根据要求选取）、微量移液器枪头（数量和种类根据要求选取）、酒精棉球、EP管（数量和种类根据要求选取）、离心机（严格检查是否能够正常使用，转速能否达到要求）、透明胶带、天平、标签、冰袋（碎冰）、泡沫盒、记录用纸和笔、垃圾袋。

4.采样记录填写要求

（1）采样记录用黑色钢笔（水性笔）填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。

（2）填写内容包括：采样牲畜编号、性别、年龄等基本信息，样品采集年月日时，采样地点，检验项目，采样者签名。

5.操作步骤

（1）根据要求选定符合条件的牲畜群。

（2）根据检测项目，确定需求的是血浆还是血清，并选择合适的真空采血管。

（3）在采血管上用记号笔写好编号（贴好标签），要求与采样记录相对应的编号。

（4）根据所需血液量，选择颈静脉或尾根静脉采血，一般采用颈静脉采血。(特别注意：采血时动脉血的鉴别)

（5）用酒精棉消毒采血部位。

（6）在静脉采血部位近心端用手指按压静脉，使静脉充盈显露。

（7）摘掉静脉穿刺针上的保护套，以左手按压静脉近心端，右手拇指和食指持穿刺针，沿静脉走向使针头和静脉成30°角，快速刺入皮肤，然后成5°角向前刺破静脉壁进入静脉腔，见回血后将刺塞针端（用橡胶管套上的）直接刺穿作好标记的真空采血管盖中央的胶塞，血液自动流入试管内，如需多管血样，将刺塞端拨出，刺入另一作好标记的负压真空管即可。达到采血量后，拨下刺塞端的采血试管。拔出针头，用酒精棉擦拭穿刺孔，勿揉。

（8）抗凝管收集血标本后，立即将采血管轻轻颠倒5～6次，使血液与抗凝剂充分混匀。（注意：一定要轻，防止溶血）

（9）立即轻轻地将采血管放置于装有冰袋（气温过高时，如夏天，一定要备足足量的碎冰）的泡沫盒内的试管架上（碎冰内）。

（10）做好采血记录，编号要求与采血管上的编号相对性。

（11）采血完毕后，产生的垃圾按规定分类装好，处理。

6.样本运输及实验前存放

（1）血液标本采取后应尽可能早的自然的使血清(浆)从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后1h内分离出血清或血浆。

（2）使用离心机做血清（血浆）分离时，尽量保持低温条件；血浆分离为3000r/min，15min，吸取上清液。将血清（血浆）分装于做好标记的EP管内（注意：如有特殊要求，按照特殊要求进行分装保存）。

（3）低温条件2～8℃或室温运输，1小时内送检（实验）。

（4）室温放置不超过4小时，4℃保存不超过8小时，-20℃保存一个月，-80℃保存二个月。长时间保存需在冰冻条件下，且只能冻融1次。

7.注意事项

（1）采血前应核对好检验项目，明确样本要求；如有特殊要求，应事先特别备注。

（2）采血前应根据检验项目，选择合适的真空采血管，抗凝管或非抗凝管，抗凝剂的选择。

（3）要防止污染，采血器具及标本容器必须化学洁净，尤其是测定微量元素，须用双蒸水洁净并且用特殊的注射器、针头和容器。

（4）血清（血浆）若出现溶血，样本按规定做废弃处理。

（5）检验项目申请为代检的需提前一天与检验科联系，以便确定送检时间、送检量，进行检测。

（6）采血前一天应完整模拟一次采血过程，严格检查仪器、器具能否正常使用。

8.抗凝剂的选择

（1）含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。

（2）EDTA、氟化物、草酸盐等不能用于测定Ca2+的标本，因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。

（3）草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本，因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用，如草酸盐可抑制AMY、ACP、LDH的活性，氟化物则有激活尿素酶、AMY的作用。

（4）草酸钾：钙离子螯合剂，常用量为1～2mg/ml血液。草酸钾虽仍可应用，但使红细胞缩小，水分从红细胞渗入血浆，使血浆成分浓度相应偏低。

（5）草酸钠：抗凝作用与草酸钾相似，常用于凝血因子测定。

（6）肝素：以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影响红细胞体积，可用于生化、血气分析及血液学检验标本，但不可用于筛选DIC的3P和TT试验，因肝素与鱼精蛋白作用，发生沉淀，使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现产生干扰。

（7）EDTA：与钙离子络合而抗凝，通常血液学常规检验应用其钾盐EDTA-K2或EDTA-K3。ED