体内药物分析课件.pptxVIP

離子對色譜法;1．離子對模型;以通式表示：

(B+)m+(A-)m?(B+?A-)m?(B+?A-)s

B+:溶質離子，A-:離子對試劑反離子，m:表示流動相，s:表示固定相

溶質離子B在固定相和流動相間的分配係數：

KB==?[A-]m=EBA[A-]m

EBA為萃取常數。溶質的分配係數決定於離子對試劑的濃度和萃取常數。萃取常數又與固定相、離子對試劑和溶質的性質、溫度有關。;2.影響容量因數的因素;2)離子對試劑的濃度：

低濃度範圍內，溶質的k隨離子對試劑的濃度升高而增大，最後趨於恒定。

對長鏈離子對試劑（如正癸烷磺酸鹽），當離子對試劑的濃度超過一定值時，k反而減少，溶質的k出現極大值現象。這是離子對試劑形成膠束的結果。

3)流動相pH:

對弱酸、弱鹼的k影響較大。;六．手性色譜法chiralchromatography;1．手性藥物分離(拆分)分析的作用

對某些手性藥物進行對映體的純度檢查；

探索血藥濃度與臨床療效的關係----生物體液中藥物對映體的分離分析；

在研製手性藥物過程中，分別評價單個對映體的效價、毒性、不良反應及藥物動力學性質。;2．手性HPLC拆分法分類

包括柱前手性衍生試劑法（chiralderivatizationreagent,CDR）,手性流動相法（chiralmobilephase,CMP）和手性固定相法（chiralstationaryphase,CSP）.

1）CDR法

對映異構體與光學純手性試劑反應，生成相應的非對映異構體。採用普通固定相分離。

(R)—SA→(R)—SE—(R)—SA

（R）—SE+

(S)—SA→(R)—SE—(S)—SA;2）CMP法;（2）環糊精類添加劑（cyclodextrins,CD）

結構特點：

環狀低聚糖，外部邊緣有許多羥基，內部為相對疏水的空腔，每個葡萄糖單元有5個手性碳原子。

常用：β-CD,γ-CD以及它們的各種改性CD。

（3）手性離子對絡合劑

帶電手性藥物與手性離子對絡合成電中性非對映體絡合物對。

常用手性離子對絡合劑：

（+）-10-樟腦磺酸，奎寧，奎尼丁等。;3）CSP法;;六．親合色譜法affinitychromatography,AC;七．離子色譜法ionchromatography;八．HPLC中的速率理論;（二）縱向擴散

縱向擴散係數β=2γDm

Dm:組分在流動相中的擴散係數，與流動相的粘???成反比，與溫度成正比。

HPLC中，流動相是液體，粘度較大；

在室溫下工作。Dm較小

HPLC的縱向擴散可以忽略不計。;（三）傳質阻抗;3.靜態流動相傳質阻抗Csm

固定相具有多孔性，部分流動相會滯留在微孔內，這部分流動相中的組分的傳質過程存在靜態傳質阻抗。

Csm

;根據速率理論，提高HPLC柱效，應採用下列條件：

小粒徑，均勻的球形化學鍵合相；

低粘度流動相，流速不宜快；

常用甲醇（η=0.54mPa?s）,乙腈（η=0.34mPa?s）作流動相成分

不用乙醇（η=1.08mPa?s）

柱溫適當。

小粒徑是保證HPLC高柱效的主要措施。;九．HPLC分析方法;（二）定量分析法;3.定量校正因數;4.定量方法;外標一點法（對比法）：

若校正曲線線性好，截距近似為零，可用。

mi=

AR及mR分別為對照品溶液在進樣體積中所含組分的品質和相應峰面積。

外標法特點：

不需用校正因數；

不需內標；

分析結果的準確度主要取決於進樣量的重複性和色譜條件的穩定性。;2）內標法;內標法特點：

可抵消樣品預處理、儀器不穩定、色譜條件不穩定、進樣量（指進樣體積）不准確等原因帶來的誤差。

通常內標在試樣預處理前加入。

內標的選擇：

內標物應是試樣中不存在的純物質；

內標物色譜峰位於被測組分色譜峰附近或幾個被測組分色譜峰中間，並與各組分峰完全分離。;3）內標校正曲線法;該法特點：

不需用校正因數；

可抵消樣品預處理、儀器不穩定、色譜條件不穩定、進樣量（指進樣體積）不准確等原因帶來的誤差。

;4）內標校正因數法;5）內加法

將待測組分的對照品加到待測試樣溶液中，測定增加對照品後的溶液中組分的峰面積比原試樣溶液中組分的峰面積的增加量，計算組分的含量。

mi=