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硫代葡萄糖苷的检测

1硫代葡萄糖苷的简介

硫代葡萄糖昔（以下简称硫昔）是主要分布于十字花科和刺山柑植物中的含硫次生代谢产物。由8-D-硫葡萄糖基、硫化肟基团和来源于氨基酸的可变侧链R组成。其生物合成途径分为三部分：前体氨基酸侧链延伸、核心结构形成及次级侧链的修饰。硫昔以稳定化合物的形式分布于植物营养器官和生殖器官中，当植物组织受到破坏时，分布于细胞质的黑芥子酶将液泡中的硫昔分解成腈、异硫氤酸酯、硫氤酸酯、恶唑烷酮等多种降解产物，反应产物因硫昔种类、金属离子、pH值等而不同，其过程十分复杂。

2硫苷生理功能

2.1增强植物抗逆性

硫昔及其降解产物具有抵御草食动物、抗病虫及抗病原微生物能力，在植物的防卫反应中发挥重要的作用。硫昔降解产物烯丙基异硫氤酸酯、2-苯乙基异硫氤酸酯、n-丁基异硫氤酸酯及1-氤基-2-苯乙烷对芸苔属专食性昆虫卵具有致死作用。其中2-苯乙基异硫氤酸酯致死剂量最低，烯丙基异硫氤酸酯、n-丁基异硫氤酸酯次之，1-氤基-2-苯乙烷最高。较适应寄主植物中异硫氤酸酯含量比适应寄主植物高，因而可推测硫昔组成及浓度对专食性昆虫有影响。异硫氤酸酯对土传病虫害防治效果因其含量、病虫对其敏感性，在土壤中的释放速率及残留时间等而不同。当植株中2-苯乙基硫昔含量增加时，蚜虫数量减少，植株抗虫性增强。

2.2诱虫作用

硫昔是黄曲条跳甲进行寄主选择的主要因素，同一蔬菜品种中硫昔含量与其选择性呈显著相关。除此之外，硫昔还能刺激小菜蛾产卵，其产卵量与硫昔含量变化趋势基本相符。因而，硫昔具有诱虫作用。

2.3致甲状腺肿大

硫昔是菜籽饼中最主要的抗营养因子，其降解产物异硫酸氤盐及恶唑烷酮能够引起畜禽甲状腺肿大，并且甲状腺受损存在种间差异。

2.4抗癌

吲哚族硫昔降解产物对S180小鼠具有抗肿瘤作用。葡萄糖莱菔子昔（硫昔中一种）降解产物萝卜硫素是蔬菜抗癌效果最好的植物活性物质，诱导人或动物体内Phase酶II（如谷光昔肽-S-转移酶、苯醌还原酶和UDP-葡萄糖醛酸转移酶）数量的增加，抑制Pha-seI酶的产生，从而阻断致癌物产生的代谢途径，抑制癌细胞分裂和生长。

3检测方法：

原子吸收法

本法可测定umol/g量的硫代荀萄糖普。重量法、容量法、侧葡萄糖法、氯化肥法气相色谱法和液相色谱法.这些方法有的操作繁复，费时，所需样品量大，再现性差，有的需要昂贵的酶试剂，而各种方法的结果又难以比较，正如Uppstrom[”在1985年国际油菜分析化学讨论会上指出的有关硫普总量的测定，需要解决的问题很多.将欲测的有机物直接（或将其转化为某种化合物后）与金属离子反应，再用原子吸收法测定反应产物中（或未反应的）过量金属离子，即可求得有机物的含量.这种方法既可扩大原子吸收法的应用范围，又可解决一些有机分析方法要用纯有机化合物做标准的困难.本文用这种方法测定了油菜籽中硫代葡萄搪普（以下简称硫普）.硫普分子虽然复杂，但经酶解后，均能无例外地定量产生等摩尔的H2SO4,而测定so4-目前一般被认为是较可靠的方法，因此若用巳知量的钡离子溶液与其反应，然后用原子吸收法测量过量的钡离子，即可间接求得硫普的含量。

实验部分：

1仪器与试剂

zeeman原子吸收分光光度计，离心机，超级恒温槽.0.01000mol/L钡标准溶液:称取l.9734gBaCo:溶于20mL2mol/L的HCI中，用水稀释至IL，用时再稀释为1.00mmol/L.0.0l000mol/LSO三一标准溶液:称取1.4204gNa:50。溶于少量水中，再稀释成1L,用时再稀释成1.00mmo1/L.油菜籽:江苏省农科院经作所提供.

2工作条件

用单纯型方法选定的最佳测定条件如下.波长:553.6nm，狭缝:1.3nm，灯电流:20mA，燃烧器高度7mm，乙炔流量2.5L/min.

3分析步骤

将一定体积含so4近中性试样溶液，移入已校正过的l0mL离心管中，加入2.00mLI.00mmol/L的Ba离子标准溶液，沸水浴5min，取出冷全室温，用水稀释至4.OmL，摇匀，在3500rPm.下离心lmin，用原子吸收法测定溶液中过量的Ba离子.

4样品分析

4.1工作曲线

往预先校正过的10mL离心试管中，分别加入1.00mol/L的so42-标准溶液。0.00、0.40、0.80、1.20、l.60mL，再分别加入2.00mL的l.00mmol/L的Ba离子标准溶液，摇匀、沸水浴5min，取出冷全室温。用水稀释至4.00mL，摇匀，在3500rPm下离心lmin.用原子吸收法测定溶液中过量的Ba离子.

5结果和讨论

5.1酸度试验结果表明，pH值为4一8时对测定无影响，故试样的测定酸度为pH5、7。

5.2加.热