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萝卜游离小孢子培养与核型分析的任务书
任务书：
实验目的：
本实验旨在通过萝卜游离小孢子培养和核型分析的方法，探究萝卜的生殖细胞形态结构和染色体数目及形态。
实验步骤：
1.准备工作：
（1）制备萝卜根尖标本；
（2）制备PBS（含乳糖）和酶解液；
（3）调节显微镜光源亮度。
2.萝卜游离小孢子培养：
（1）将萝卜根尖用PBS洗涤干净，把根尖放在含有酶解液的小玻片上；
（2）将小玻片放入含有水的培养皿中，使用另一个培养皿盖住；
（3）将培养皿放入恒温器，并保持适宜的温度和湿度，以促进小孢子的释放和发育；
（4）观察培养皿中的小孢子发育情况，记录其生长特点及孢子大小和形态。
3.核型分析：
（1）在生长良好的小孢子中选择一个健康的、大小适当的单倍体细胞；
（2）将该细胞放入含有KCl的液体中浸泡，使细胞膨大；
（3）将膨大的细胞加入固定液中，使细胞变形固定，挂在载玻片上；
（4）加入蒸馏水并振荡，使染色体散开；
（5）加入染色剂，染色30分钟后用蒸馏水洗净；
（6）加入几滴甲醛溶液固定、脱水、透明化；
（7）覆盖好玻片，用显微镜观察细胞核的形态和染色体数量及形态。
实验所需材料：
萝卜根尖、PBS（含乳糖）、酶解液、小玻片、培养皿、显微镜、载玻片、KCl、蒸馏水、染色剂、甲醛。
实验注意事项：
1.萝卜根尖标本要新鲜活泼；
2.酶解液中酶的浓度不能太高，否则会破坏细胞核；
3.使用显微镜要注意放大倍数和光源亮度；
4.染色剂的浓度和时间要适宜，否则会影响染色体的清晰度和对比度；
5.甲醛溶液有毒，要注意防止吸入和接触。
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