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第2节微生物的培养技术及应用一微生物的基本培养技术学习目标核心素养1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。1.科学思维:根据微生物的代谢类型分析培养基的组成。2.科学探究:讨论并掌握无菌技术的实验操作方法;讨论并掌握微生物的纯培养的方法。从社会中来向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶,由于制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制酸奶,自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么,怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?酸奶应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,避免杂菌进入。这需要应用无菌技术和微生物的培养技术19世纪中期,法国酿酒业曾一度遭到毁灭性打击,生产的葡萄酒出现了变酸变味的怪事…法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了微生物。一、微生物概述难以用肉眼观察的微小生物1.微生物的概念:_________________________的统称。病毒原核生物(细菌、蓝细菌等)原生生物(如草履虫、衣藻等)真菌(如酵母菌、霉菌等)草履虫酵母菌细菌新冠病毒2.研究和应用微生物的前提(也是发酵工程的重要基础)是:_______________________、_______________________。防止杂菌污染获得纯净的微生物培养物3.实验室培养微生物的条件:营养和环境①要为人们需要的微生物提供合适的___________条件;其他微生物无法混入②要确保__________________,并将需要的微生物分离出来。有无琼脂长有酵母菌菌落盛有液体培养基二、培养基的配制微生物对营养物质的不同需求1.概念:人们按照__________________________,配制出供其生长繁殖的营养基质,即培养基。2.作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。3.类型:液体培养基固体培养基分离、计数、鉴定等扩大培养、工业生产延伸:培养基的类型及用途划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分用途液体培养基工业生产不加凝固剂观察微生物的运动、分类鉴定半固体培养基加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种固体培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产天然培养基培养基成分明确分类、鉴定合成培养基在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物选择培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别培养基鉴别不同种类微生物培养基+氨苄青霉素培养基培养基中加氨苄青霉素没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰没有氨苄青霉素抗性的细菌具有抗氨苄青霉素能力的菌落选择培养基怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?伊红美蓝采用__________培养基培养,大肠杆菌的菌落呈现____色。黑鉴别培养基尿素氮源以_____为惟一_____的培养基对土壤中的分解尿素的细菌进行筛选。选择培养基通常在培养基中加入______指示剂,培养分离出的细菌,若指示剂变____,可以准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。因为分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨,使培养基的pH______。酚红红鉴别培养基升高当需要酵母菌和霉菌时,可以在培养基中加入青霉素,以抑制细菌和放线菌的生长,从而分离出酵母菌和霉菌;在培养基中加入高浓度的食盐溶液可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,可以将金黄色葡萄球菌分离出来。选择培养基无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-有机碳源:葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等NH4+、NO3-、NH3等无机氮源:有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等4、培养基的营养构成:凡是能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。(1)基本成分:碳源、氮源、水、无机盐。(自养微生物的碳源)①碳源:(异养微生物的碳源)②氮源:注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。Ca、K、Mg为大量元素Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素③无机盐:pH、特殊营养物质、氧气(2)还需满足微生物对的需求维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等特殊营养物质:(天然物质牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)维生素①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加_______;酸性②培养霉菌时,需要将培养基调至_____;中性或弱碱性③培养细菌时,需要将培养基调至_____________;无氧④培养厌氧微生物时,需要提供_____的条件。例:某种细菌培养基的营养构成表1-11000ml牛
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