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重组人干扰素λ3的制备及聚乙二醇修饰的中期报告

一、实验目的

制备重组人干扰素λ3和其聚乙二醇修饰物，并对其进行初步的理化性质分析。

二、实验步骤

1、构建重组人干扰素λ3的表达质粒，经验证后在重组大肠杆菌中表达。

2、经过分离纯化，得到纯度较高的重组人干扰素λ3。

3、对重组人干扰素λ3进行聚乙二醇修饰，得到聚乙二醇修饰的重组人干扰素λ3。

4、通过SDS、Westernblot和HPLC等方法，对重组人干扰素λ3和其聚乙二醇修饰物进行理化性质分析。

三、实验进展情况

1、构建表达质粒

已选定载体和限制性内切酶，已完成重组人干扰素λ3基因的克隆。

2、表达和纯化

构建的表达质粒已经转化到大肠杆菌中，并进行了诱导表达。通过分离纯化得到了重组人干扰素λ3的纯品。

3、聚乙二醇修饰

暂未进行。

4、理化性质分析

已经进行了SDS和Westernblot实验，初步验证了纯化得到的重组人干扰素λ3的纯度和表达情况。

HPLC实验正在进行中，结果待得到。

四、存在问题

1、聚乙二醇修饰的具体条件及步骤需要进一步确定。

2、理化性质分析需要进一步完善，加强实验次数和结果比对。

3、需进行更多的功能性及生物学特性的实验验证。

五、下一步计划

1、继续进行聚乙二醇修饰实验，优化反应条件。

2、加强理化性质分析，如HPLC、质谱等分析方法。

3、进行更多的功能性及生物学特性实验。