DB35_T+897-2009食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T含量的测定.docx

DB35

福 建 省 地 方 标 准

DB35/T897—2009

食品中碱性橙、碱性嫩黄O

和碱性桃红T含量的测定

2009-03-11

2009-03-11发布

2009-04-01实施

福建省质量技术监督局发布

DB35/T897—2009

前 言

本标准的附录A、B为资料性附录。

本标准由福建省质量技术监督局提出并归口。本标准由福建省质量技术监督局批准。

本标准起草单位：福建省中心检验所。

本标准主要起草人：郑小严、黄红霞、林钦、戴明、黄永辉、梁敏、王征。本标准系首次发布。

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DB35/T897—2009

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DB35/T897—2009

食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T含量的测定

范围

本标准规定了高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法测定食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红

T含量的方法。

本标准适用于蜜饯、水产品、豆制品、食用菌、炒货、坚果和固体调味品中碱性橙、碱性嫩黄O

和碱性桃红T含量的测定。

本标准高效液相色谱法检出限为：碱性橙0.02mg/kg；碱性嫩黄O0.03mg/kg；碱性桃红T0.004mg/kg；定量限为：碱性橙0.06mg/kg；碱性嫩黄O0.1mg/kg；碱性桃红T0.02mg/kg。

本标准液相色谱-串联质谱法检出限为：碱性橙0.6μg/kg；碱性嫩黄O0.3μg/kg；碱性桃红T0.7μg/kg；定量限为：碱性橙2μg/kg；碱性嫩黄O1μg/kg；碱性桃红T2μg/kg。

规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修改版均不适用于本标准；然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

第一法高效液相色谱法

原理

试样通过碱化甲醇提取，二氯甲烷萃取，正己烷净化，高效液相色谱紫外检测器串联荧光检测器同时检测食品中碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T含量，外标法定量。

试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，试验用水为符合GB/T6682规定的一级水。

甲醇：色谱纯。

甲酸：优级纯。

氨水：优级纯，含量为25%。

磷酸：优级纯。

氯化钠。

二氯甲烷。

无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却到室温，贮于密封瓶中备用。3.2.9 碱化甲醇：500mL甲醇（3.2.2）+10mL氨水（3.2.4）。

3.2.10 酸化甲醇：500mL甲醇（3.2.2）+10mL甲酸（3.2.3）。

甲醇饱和正己烷：正己烷加入少量甲醇，直至分层出现。

2%氨水（体积百分比）：取2mL氨水（3.2.4）用纯水稀释到100mL。

3.2.13 0.05%磷酸（体积百分比）：取0.5mL磷酸（3.2.5）用纯水稀释到1000mL。

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碱性橙标准品（Chrysoidine，Cas532-82-1，C12H12N4·HCl，分子量248.71，纯度≥99%）。

碱性嫩黄O标准品（AuramineO，Cas2465-27-2，C17H21N3·HCl，分子量303.83，纯度≥98%）。

碱性桃红T标准品（SafranineT，Cas477-73-6，C20H19N4Cl，分子量350.84，纯度≥99%）。

碱性橙、碱性嫩黄O、碱性桃红T混合标准储备溶液：准确称取20.0mg碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T标准品，用甲醇（3.2.2）溶解定容到100mL,配制成200μg/mL的标准储备液。4℃冰箱放置，3个月内使用。

碱性橙、碱性嫩黄O、碱性桃红T混合标准溶液：准确移取适量混合标准储备液（3.2.17），用酸化甲醇（3.2.10）稀释成0.05μg/mL～1μg/mL的标准系列。4℃冰箱放置，一周内使用。

仪器与设备

高效液相色谱仪：配紫外和荧光检测器。

高速万能粉碎机。

涡旋混合器。

氮气吹干仪。

水循环真空泵。

旋转蒸发仪。

超声波发生器（40KHz/600W）。

冷冻高速离心机：15000r/min。

3.3.9 分析天平（感量0.0001g和0.1g）。

3.3.10高速匀浆机。

试样制备和保存

取有代表性样品500g，用粉碎机或匀浆机粉碎，混匀，分成2份，装入洁净容器内，密封并标识。

分析步骤

试样的提取净化

称取5g（精确到1mg）试样，置于50mL离心管中，准确加入20.0mL碱化甲醇（3.2.9），超声提取30min；于4℃，150