3.1重组DNA技术的基本工具(教学课件）- 高二生物人教版选择性必修三.pptxVIP

国际基因工程机器大赛

;;;;;;;1.你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？;;;;;;;;;1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（）

A．GAATTCB．GGGGCCCC

CTTAAGCCCCGGGG

C．CTGCAGD．CTAAATC

GACGTCGATTTAG;;;;;;;;;;;;;;;(1)通过基因工程产生的变异是不定向的()

(2)限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列()

(3)DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来()

(4)限制酶和解旋酶的作用部位相同();一、基因工程的理论基础

1.为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？;2.为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？;1.(2022·天津耀华中学高二期中)以下是几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是;2.(不定项)DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述错误的是

A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键

B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键

C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D.有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接

双链DNA片段的平末端;;;;;;探究?实践;重组DNA分子;4.请尝试用胶带模拟DNA连接酶，将Bt基因重组到pBI121质粒上。重组DNA分子的实验中往往会将多个酶切后的Bt基因和pBI121质粒混合后，再加入DNA连接酶，其连接产物可能有多少种？请大家尝试操作。;重组DNA分子;重组DNA分子;(1)获取目的基因和切割载体时,通常使用同种限制酶,目的是为了

。但是使用该法缺点是容易发生

以及，为了避免上述情况发生，可采取的措施是

。;(3)选择限制酶切割位点的基本原则：

①切割目的基因时：。

②切割质粒时：。;【例】①用图1中的质粒和图2中的外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是

_______________________________________________。

②构建重组质粒时，最好选择限制酶BamHⅠ、HindⅢ处理质粒、外源DNA，这样做的目的是_________________________________________________。;课后练习;课后练习;（3）由于反应体系中含有大量的外源DNA片段和质粒，加入PstI一种限制酶后，会得到大量的目的基因片段和质粒片段，再加入DNA连接酶后，除了会形成目的基因与质粒连接的环状产物外，还会形成______________________连接的环状产物以及_____________________连接的环状产物。此外，目的基因与质粒的连接既可以是正向连接，也可以是____________，后者可能会导致目的基因无法正常表达。;;(1)作为载体的质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因()

(2)质粒是环状双链DNA分子，是基因工程常用的载体()

(3)载体(如质粒)和细胞膜中的载体蛋白的成分相同()

(4)作为载体，必须要有标记基因();3.下列关于基因运输工具——载体，必须具备的条件之一及理由均正确的是

A.能够复制，以便目的基因插入其中

B.具有多个限制酶切割位点，便于目的基因的表达

C.具有某些标记基因，便于重组DNA的筛选

D.对受体细胞无害，便于重