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赤芍总苷抗实验性肝损伤和抗乙型肝炎病毒的药效学研究的任务书
任务书
研究题目:赤芍总苷抗实验性肝损伤和抗乙型肝炎病毒的药效学研究
研究目的:
1.探讨赤芍总苷对实验性肝损伤的抗炎、抗氧化和肝细胞保护作用。
2.评估赤芍总苷对乙型肝炎病毒的抑制作用及其抗病毒机制。
研究内容:
1.体外细胞实验
(1)建立实验室体外乙型肝炎病毒感染细胞模型,使用MTT法测定赤芍总苷对细胞增殖和生存的影响;
(2)采用荧光定量PCR和ELISA法测定赤芍总苷对乙型肝炎病毒的抑制效果。
2.实验动物模型的建立
利用CCL4造成实验性肝损伤的大鼠模型和HBV-TG转基因小鼠感染模型。
3.体内实验
(1)采用血清生化法、组织学和免疫组织化学检测赤芍总苷对实验性肝损伤的保护作用和抗炎、抗氧化、抗纤维化效应;
(2)采用流式细胞术和体外培养法检测赤芍总苷对肝内免疫细胞的调节作用;
(3)检测赤芍总苷对HBV-TG小鼠血清和肝内病毒载量的影响,以及对肝脏病理损害的缓解作用。
研究方法:
1.建立实验室体外乙型肝炎病毒感染细胞模型
(1)选取具有良好增殖和传代能力的无血清培养细胞(例如HepG2.2.15);
(2)调整培养基成分,优化细胞培养条件;
(3)感染乙型肝炎病毒样品;
(4)加入不同浓度的赤芍总苷处理细胞。
2.大鼠模型的建立
(1)选择健康雄性SD大鼠,将其分为正常对照组、模型组和赤芍总苷干预组;
(2)给予大鼠CCL4造成肝损伤;
(3)赤芍总苷干预。给予赤芍总苷口服或注射;
(4)取样测定血清生化指标、组织学和免疫组织化学。
3.HBV-TG转基因小鼠感染模型的建立
(1)选取健康HBV-TG转基因小鼠,将其分为对照组、模型组和赤芍总苷干预组;
(2)接种乙型肝炎病毒;
(3)赤芍总苷干预。给予赤芍总苷口服或注射;
(4)取样测定血清和肝脏乙型肝炎病毒标志物、病理学和免疫组织化学。
研究预期成果:
1.探明赤芍总苷对实验性肝损伤的抗炎、抗氧化和肝细胞保护作用。
2.评估赤芍总苷对乙型肝炎病毒的抑制作用及其抗病毒机制。
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