SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量.pptVIP

  • 6
  • 0
  • 约2.99千字
  • 约 32页
  • 2024-04-02 发布于广西
  • 举报

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量.ppt

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量

;

SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳技术是动物生物化学实验技术教学中一个重要实验之一。

;能够带动生化实验技术综合型实验工程的开设。

如:蛋白质盐析沉淀提取→葡聚糖凝胶层析别离→DEAE-纤维素别离提纯蛋白质→蛋白质纯度鉴定、蛋白质分子量测定等。;一、实验目的;二、实验原理;区带电泳使用不同的支持介质,有滤纸、纤维素粉、聚氯乙烯树脂、淀粉凝胶、琼脂凝胶、醋酸纤维素膜,现在那么多用聚丙烯酰胺〔PAGE〕和琼脂糖凝胶。

;;2.不连续系统:由于缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性,带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应,分子筛效应,还具有浓缩效应,因而其别离条带清晰度及分辨率均较前者佳。;;蛋白质在一定浓度的含有强复原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物。

蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,因此在进行电泳时,;蛋白质分子移速度取决于分子大小。当分子量在15000KD到200000KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系。合下式:,式中

将分子量的标准

文档评论(0)

1亿VIP精品文档

相关文档