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hrp辣根过氧化物酶显色原理
HRP(horseradishperoxidase,HRP)辣根过氧化物酶显色原理是基于HRP过氧化物
酶在受体膜中能将过氧化物类物质(如H2O2)分解为氧气(O2)和水(H2O),从而产生
可视化检测效果的原理。本原理应用于多种生物分子定量或存在性的检测,是一种被广泛
使用的荧光免疫技术。
1、HRP的作用原理
HRP是一种过氧化物酶,它能将双氧水(H2O2)分解为氧气(O2)和水(H2O)。当
HRP和一种特定过氧化物结合在一起时,它被激活,可以将过氧化物分解为活性氧物质。
因此,HRP及其分解的活性氧物质可以抑制旁路反应,并有助于受体与真核和原核表达的
基因的联系,从而保持这些蛋白质的功能。
2、HRP显色技术的基本流程
HRP显色技术的基本原理包括以下几个主要步骤:样品处理,抗体的引物制备,受体
的预染示踪物和表面修饰;样品的诊断,互补双核糖核酸(cDNA)或cRNA富集,基因沉
淀和标记,实时荧光定量PCR(qPCR)检测、基因测序以及蛋白质组学等。最后,HRP和
适当的荧光探针组合可以加以利用,从而探寻和分析抗原或受体的存在和可调控表达。
HRP显色技术具有检测特定原核和真核表达基因的能力、快速高效的离体检测和减少
误测试的能力。同时,它可以快速检测多个基因表达水平的变化,并且可以定量同时探测
多个模式。此外,HRP显色技术还可以检测复杂细胞培养液、细胞内和细胞外环境的变化。
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