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DEAE-52在中药多糖分离纯化中的应用

野津;张文森;王知斌;杨春娟;匡海学

【期刊名称】《《化学工程师》》

【年(卷),期】2019(033)011

【总页数】4页(P43-45,22)

【关键词】DEAE-52;多糖;分离纯化

【作者】野津;张文森;王知斌;杨春娟;匡海学

【作者单位】黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室;黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【正文语种】中文

【中图分类】R284.2

多糖，天然大分子化合物，由10个以上的单糖通过糖苷键链接而成的多聚物，广

泛存在于多种生物体中，主要分布在植物、动物细胞膜和微生物细胞壁中[1]，是维持生命活动的物质基础之一。中药多糖则是指从植物、动物体内和微生物中分离的活性多糖成分的总称，近年来中药多糖因具有多种生物活性引起广泛关注，具体表现在抗肿瘤、抗病毒、免疫调节等作用[2-4]，对机体无毒副作用，多糖的生物活性与其纯度和化学结构有着重要的关系，因此，分离、纯化多糖显得尤为的重要，随着离子交换剂DEAE-52在分离纯化的广泛应用，中药多糖的分离纯化效率显著的提高，本文就DEAE-52在分离纯化中药多糖进行概括和论述，以期为多糖的利

用和开发提供参考。

DEAE-52性质

DEAE-52是一种阴离子交换剂，是在纤维素中引进二乙基氨基乙基这种交换基团而形成的高分子聚合物，由高分子聚合物基质、电荷基团、反离子3部分组成，与溶液中的其他离子或离子化合物以离子交换的方式结合，不改变本身和被结合离子或离子化合物的性质，因其物理和化学性质稳定，所以常常作为离子交换层析法的固定相，由于离子半径、离子化合价、溶液的pH值、离子强度、有机溶剂、交联度、膨胀度等不同，吸附的物质也不同。

分离原理

高分子聚合物和电荷集团通过共价结合，形成一个带电的可进行离子交换的基团。反离子是结合于电荷基团上的平衡离子，它能与溶液中其它的离子基团发生可逆的交换反应，分离的过程将溶液中的待分离成分，依靠库仑力和电荷差异吸附在离子交换剂上，选择适合的洗脱剂将吸附剂在离子交换剂上的成分洗脱下来，达到分离的目的。不仅可以分离多糖，还能达到脱色的效果，主要是分离中性多糖与酸性多糖，当粗多糖溶液通过时，中性多糖可以流出，酸性多糖吸附在色谱物质中，从而实现对多糖的分离。采用不同离子强度溶液分步洗脱，得到不同组分的多糖，达到分离效果。

使用方法

装柱前处理

DEAE-52离子交换剂装柱前之前要充分溶胀，溶胀后，离子交换剂孔隙增大，利于离子交换。溶胀的同时可以将溶液中的悬浮杂质去除，接下来进行酸碱浸泡，首先用0.5mol·L-1NaOH溶液浸泡1h以上，抽滤，去离子水反复冲洗至中性；再用0.5mol·L-1HCl溶液浸泡1h以上，抽滤，去离子水冲洗至中性，再用0.5mol·L-1NaOH溶液中，同样处理，洗至中性，最后排出气泡，这是阴离子交

换剂的处理方法。

再生及保存

对于使用过的DEAE-52离子交换剂可以反复再生使用，需要酸碱交替浸泡多次，使其恢复原来性状的过程，才可以使用。再生处理可先用高浓度NaCl过柱冲洗柱床，以除去离子柱所吸附的成份。然后，再用HCl和NaOH处理，处理方法与预处理完全相同。只有介质保存于20%的乙醇中，存放4℃，目的是防止介质滋生细菌。

DEAE-52在中药多糖分离纯化中的应用

对植物多糖的分离纯化

植物多糖是中药多糖的主要来源，目前利用DEAE-52分离纯化多糖研究较深入的有黄芪多糖、五味子多糖、金银花多糖、党参多糖、车前子多糖等。黄芪多糖是黄芪的有效成分之一，具有抗肿瘤、抗炎、降糖、免疫调节等作用[5,6]，采用DEAE-52离子交换层析法，依次用双蒸水、0.1、0.2和0.3mol·L-1的NaCl的溶液进行洗脱，得到两种均一多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ，分子量分别为1.06×104Da和2.47×106Da，为进一步研究黄芪多糖的生物活性研究提供了理论基础[7]。五味子为我国传统中药材，历史悠久，主要用于保护心血管、保护心肌、降血脂等作

用，研究发现，五味子多糖具有多种生理活性[8]，采用DEAE-52离子交换层析法，用一系列不同浓度的NaCl溶液洗脱，得到分子量191.18kDa的中性多糖，实验

表明此中性多糖具有降低糖尿病大鼠的血糖作用[9]。金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，清热解毒类中药的代表药物，研究发现多糖是有效成分之一，采用DEAE-52离子交换层析法对金银花多糖进行分离[10]，分别用蒸馏水、0.1，0.2，0.3mol·mL-1