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PRRSV流行毒株NSP2、PRF5遗传变异分析及其弱毒疫苗免疫效果评价的开题报告
摘要
猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）是危害猪业的主要病原体之一，常导致流产、仔猪死亡率增高等问题。本研究选取两种PRRSV流行毒株NSP2、PRF5，进行遗传变异分析，并研究其在弱毒疫苗中的应用效果。本研究通过PCR扩增NSP2、PRF5区域的序列，并进行序列分析，探讨其遗传特征及变异情况。同时，利用这两种毒株构建弱毒疫苗，通过动物实验比较其与商业疫苗的免疫效果差异。
关键词：PRRSV；NSP2；PRF5；遗传变异；弱毒疫苗；免疫效果
第一部分研究背景及意义
PRRSV是猪繁殖与呼吸综合症的致病原，常引起猪产业的巨大损失。PRRSV的变异性极高，导致其疫苗研究、防治等方面的难度增大。本研究选取两种PRRSV流行毒株NSP2、PRF5，进行遗传变异分析，并研究其在弱毒疫苗中的应用效果，旨在探索新的PRRSV弱毒疫苗研究方向，提高疫苗防治方面的实用性和研究水平。
第二部分研究内容
2.1实验材料及方法
2.1.1研究材料
选取两种PRRSV流行毒株NSP2、PRF5。
2.1.2研究方法
（1）PCR扩增NSP2、PRF5区域的序列。
（2）利用PCR扩增产生的片段进行Sanger测序。
（3）使用序列分析软件分析序列，探讨其遗传特征及变异情况。
（4）将NSP2、PRF5所得序列，构建为弱毒疫苗，并通过动物实验比较其与商业疫苗的免疫效果差异。
2.2预期结果及意义
（1）对NSP2、PRF5区域进行序列分析，探讨其遗传特征及变异情况。
（2）构建弱毒疫苗，并通过动物实验比较其与商业疫苗的免疫效果差异。
（3）为进一步研究PRRSV疫苗提供新的方向和思路，提高疫苗防治方面的实用性和研究水平。
第三部分研究计划
3.1时间安排
本研究将于2021年9月开始，预计在2022年6月完成。
3.2实验安排
（1）采集两种PRRSV流行毒株NSP2、PRF5。
（2）进行PCR扩增NSP2、PRF5区域的序列，并进行Sanger测序。
（3）利用序列分析软件分析序列，探讨其遗传特征及变异情况。
（4）构建弱毒疫苗，并进行动物实验比较其与商业疫苗的免疫效果差异。
3.3预期结果
（1）遗传特征及变异情况分析报告。
（2）弱毒疫苗构建与动物实验结果报告。
3.4实验预算
（1）病毒分离鉴定：5000元
（2）实验耗材及仪器设备：10000元
（3）动物实验：10000元
（4）序列分析：5000元
（5）数据处理及文献检索：3000元
总计：33000元
参考文献
[1]陈宁,王忠.猪繁殖与呼吸综合症病毒流行病学与防控途径[J].中国畜牧医学,2020,47(05):40-44.
[2]张翼,王光瑞,张新东等.PRRSVNADC30和VR-2332株NSP2的同源与异源保护性研究[D].山东农业大学研究生院,2020.
[3]徐来天,蔺秀英,孙芳等.猪繁殖与呼吸综合症病毒弱毒苗研究现状[J].四川动物科学,2020,39(02):95-97.
[4]黄俊杰,梁宇晴,温璐,等.猪繁殖与呼吸综合症病毒NSP2基因的同源性和变异性分析[J].畜牧兽医学报,2019,50(06):1649-1656.
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