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人类DNA聚合酶η结构与催化机制的研究的开题报告

开题报告

题目：人类DNA聚合酶η结构与催化机制的研究

一、研究背景

DNA聚合酶是细胞中负责DNA复制的关键酶类之一，它能够通过将DNA单链沿着模板DNA复制产生出两条新的DNA链。在这一过程中，DNA聚合酶需要准确地选择和嵌入正确的核苷酸，以保证DNA复制的准确性和稳定性。DNA聚合酶η是DNA聚合酶的一种，在DNA损伤修复过程中发挥着重要作用。DNA损伤是导致人类疾病的重要原因之一，因此对于DNA聚合酶η在DNA修复中的结构和催化机制的了解是十分必要的。

二、研究目的

本研究旨在通过采用X射线晶体学和生物化学等手段，解析人类DNA聚合酶η在DNA损伤修复中的结构与催化机制，为将来开发DNA损伤修复相关疾病的治疗方法提供依据。

三、研究内容

1.人类DNA聚合酶η的表达、纯化、结晶和X射线晶体学结构解析；

2.人类DNA聚合酶η在DNA损伤修复中的催化机制的研究，包括DNA聚合酶η对DNA损伤的识别、DNA聚合酶η的三维结构与DNA结合、催化反应中的催化中心和催化机制等方面的探讨；

3.生物化学方法的应用，探究人类DNA聚合酶η在体中的功能。

四、研究意义

1.直接测定人类DNA聚合酶η的结构，揭示其催化反应机制，为将来理解细胞DNA损伤修复机制提供重要的依据。

2.基于DNA聚合酶η的结构和催化机制，为筛选和设计药物提供突破口，为预防和治疗DNA损伤相关疾病提供依据。

3.新的方法和技术的建立，为将来探索DNA聚合酶相关的新领域提供技术支持和基础数据。

五、研究方法

1.采用质谱、生物物理等手段对DNA聚合酶的功能进行分析；

2.应用晶体学技术测定DNA聚合酶的高分辨晶体结构；

3.在结合酶相关物质如底物和配体，以及在催化过程中构建异常的合成DNA链等条件下，在晶体内结合酶进行结构测定和较小分子解析；

4.运用生化学和生物学方法，确认采用切割和点突变技术，对关键区域进行改变，来阐明其功能。

六、研究计划

本研究计划持续三年，总计划分为三个阶段：

第一年：学习晶体学技术，学习相关生物物理技术，开始DNA聚合酶的纯化和结晶实验；

第二年：DNA聚合酶晶体结构的解析和催化机制研究；

第三年：技术的进一步完善和DNA聚合酶相关药物的筛选。

时间节点：

第一年：

1.DNA聚合酶的纯化和结晶实验。3-12个月。

2.学习晶体学和生物物理等方法。1-12个月。

第二年：

1.DNA聚合酶的高分辨结晶结构解析。1-24个月。

2.DNA聚合酶催化机制的研究。12-24个月。

第三年：

1.技术的进一步完善。24-32个月。

2.DNA聚合酶相关药物的筛选。24-36个月。