维生素类药物的分析.pptVIP

毛细管色谱柱选择柱内径特点复杂样品分析0.20mm0.25mm高柱效高分离度在分流模式下进行复杂样品分析0.32mm高分离度较高柱容量复杂样品，宽的浓度范围，可用分流、不分流和直接进样模式0.53mm较好分离度很高的柱容量最适合作纯度分析和痕量分析，直接进样，升级替代填充柱第95页,共98页，2024年2月25日，星期天样品容量与柱内径、膜厚及溶解度关系，记住相似相溶原理一般厚膜柱适合分析低沸点样品；薄液膜适合分析高沸点化合物，同时固定相流失少。检测器：主要有热导检测器（通用）、氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器第96页,共98页，2024年2月25日，星期天样品→dl－α－生育酚固定相→十八烷基硅烷键合硅胶流动相→甲醇-水（49：1）检测波长→292nmR＞2.6RSD≤0.8%（二）RP-HPLC法（外标法）第97页,共98页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第98页,共98页，2024年2月25日，星期天（三）高效液相色谱法血浆中维生素C的测定(稳定性）标准溶液包括样品预处理过程均需加入偏磷酸，偏磷酸同时可用于血样中的蛋白沉淀；当天取血当天测定；处理好的样品亦需冰箱保存第63页,共98页，2024年2月25日，星期天第四节维生素D的分析一、结构与性质（一）结构维生素D2(麦角骨化醇)维生素D3(胆骨化醇)第64页,共98页，2024年2月25日，星期天1.性状：无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味。2.溶解性：宜溶于有机溶剂，在植物油中略溶，在水中不溶。3.不稳定性：含有多个烯键，所以极不稳定，宜氧化变质，效价降低，毒性增强。（二）性质第65页,共98页，2024年2月25日，星期天4．旋光性维生素D26个手性碳原子维生素D35个手性碳原子5．显色反应：甾类化合物氯仿溶液黄色红色紫色绿色6．紫外吸收特性：无水乙醇265nm醋酐硫酸第66页,共98页，2024年2月25日，星期天二、鉴别试验（一）显色反应1．与醋酐-浓硫酸反应氯仿溶液黄色红色紫色绿色醋酐硫酸2．与三氯化锑反应本品1,2-二氯乙烷三氯化锑试液橙红色粉红色第67页,共98页，2024年2月25日，星期天3．其它显色反应维生素D三氯化铁橙黄色二氯丙醇乙酰氯绿色（二）比旋度鉴别无水乙醇溶液维生素D2比旋度为＋102.5°至＋107.5°维生素D3比旋度为＋105°至＋112°第68页,共98页，2024年2月25日，星期天（三）其它鉴别方法薄层色谱法、HPLC法制备衍生物测熔点紫外、红外吸收光谱（四）维生素D2、D3的区别反应维生素D2维生素D396%乙醇10ml取0.1ml乙醇1ml和85%硫酸5ml红色λmax570nm黄色λmax495nm第69页,共98页，2024年2月25日，星期天三、杂质检查（一）麦角甾醇的检查维生素D290%乙醇溶液洋地黄皂苷溶液不得发生浑浊或沉淀第70页,共98页，2024年2月25日，星期天（二）前维生素D的光照产物第71页,共98页，2024年2月25日，星期天四、含量测定正相高效液相色谱法（一）维生素D测定法含量以单位表示每单位相当于维生素D0.025μg注意：计算的是维生素D及前维生素D经折算成维生素D的总量第72页,共98页，2024年2月25日，星期天测定在半暗室及避免氧化的情况下进行第一法：无干扰杂质第二法：有VA及其他杂质干扰第三法：用第二法时，前VD峰受杂质干扰仅VD峰可分离第73页,共98页，2024年2月25日，星期天第一法内标物：邻苯二甲酸二甲酯色谱条件及系统适用性试验：填充剂：硅胶流动相：正己烷-正戊醇（997：3）检测波长：254nm无干扰杂质第74页,共98页，2024年2月25日，星期天维生素D3△光照前维生素D3反式维生素D3维生素D3速甾醇D3与维生素D3的比保留时间分离度＞1.0＞1.0溶液组成先后进样5次，维生素D3峰面积的RSD≤2.0%0.50.61.01.1系统适用性试验第75页,共98页，2024年2月25日，星期天校正因子测定：