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慢病毒载体介导nanog基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞的开题报告

一、研究背景和意义

干细胞的能力使其成为一个重要的候选治疗方案，以治疗各种疾病。近年来，体内和外源性Nanog表达的调控已经证明是维持干细胞功能的关键因素之一。由于骨髓间充质干细胞（BMSCs）有着在不同成体组织中分化的潜力，基因修饰BMSCs提供了一个潜在的治疗选项，尤其是在干细胞治疗癌症方面。

然而，传统的外源DNA转染、电转染和基因炮等技术对于干细胞的基因转染仍存在诸多问题，如低转化率，细胞毒性和免疫反应等。

慢病毒（LVs）具有在非增殖态和增殖态细胞中持续表达转基因的潜力。因此，LVs已被广泛用于有效地传递外源基因并产生长期的表达。近年来，慢病毒载体被用于BMSCs中的基因条形化应用也被广泛研究。

因此，我们的研究旨在利用慢病毒载体将Nanog基因转导入小鼠BMSCs，寻求并评估这种技术对BMSCs扩增能力和增殖能力的影响，为基于BMSCs转基因治疗的疾病治疗提供新的策略和思路。

二、研究计划

1.实验材料准备

小鼠BMSCs分离和培养；慢病毒载体构建和制备；Nannog基因克隆、纯化和验证；LysoTrackerRed和4,6-二氨基-2-苯并硫氧?（DAPI）染色剂；PCR，RT-PCR，西方印迹（WesternBlotting）技术的实验室设备和试剂。

2.实验步骤

（1）构建重组慢病毒载体

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