副干酪乳杆菌发酵液中抗菌肽的筛选及对副溶血性弧菌的抑菌作用.pdf

第24卷第1期中国食品学报Vol.24No.1

2024年1月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJan.2024

副干酪乳杆菌发酵液中抗菌肽的筛选及对副溶血性弧菌的抑菌作用

邢宇凡1，白淑锦1，金日天13，翁武银13，丁能水4，张志刚2，杨桑13

（集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021

2厦门银祥集团有限公司肉食品安全生产技术国家重点实验室福建厦门361100

3海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心大连工业大学辽宁大连116034

4福建傲农生物科技集团股份有限公司福建省生猪营养与饲料重点实验室福建漳州363000)

摘要副溶血性弧菌是一种常见的食源性致病菌，严重威胁食品安全和人体健康。本研究利用超高效液相色谱-质谱联用

技术鉴定副干酪乳杆菌发酵液中的多肽序列，并通过生物信息学筛选出可能的抗菌序列（RQQAENLAKFAKKG)，命名为

Yt9z。研究结果表明其对副溶血性弧菌的最低杀菌质量浓度（MBC)为125μg/mL,可在3h内将细菌完全杀死。通过膜通

透、透射电镜、DNA凝胶阻滞分析、圆二色谱等试验探究其抑菌机制，结果在不同溶液环境下，抗菌肽Yt9z能改变自身的二

级结构，进而增加细菌细胞膜通透性，并穿透细胞膜与DNA结合使其死亡。这些发现为抗菌肽Yt9z应用于副溶血性弧菌

污染提供了理论参考。

关键词副溶血性弧菌；副干酪乳杆菌；抗菌肽；细胞膜；DNA结合

D0I:10.16429/j.1009-7848.2024.01.010

文章编号1009-7848(2024)01-0092-10

副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐细菌，而完成杀菌作用U。

主要存在于鱼、虾、贝类等水产动物以及腌菜、咸本研究采用超高效液相色谱-质谱联用技术

肉和咸鸭蛋等高盐食品中。它是一种常见的食源鉴定副干酪乳杆菌发酵液小分子多肽序列，通过

性病原体，可引发腹泻、呕吐、头痛、腹部痉挛等病生物信息学筛选出可能具有抑菌活性的氨基酸序

症。此外，它还可以形成保护宿主的生物膜,从而列，合成后研究其对副溶血性弧菌的抑菌活性及

对抗生素产生耐药性3。发掘更安全、有效的抑菌机理,以期为副溶血性弧菌的防治提供理论依据。

剂至关重要。

抗菌肽是一种具有广泛抑菌活性的阳离子多1

材料与方法

肽，可对病原体进行多靶点破坏，如通过静电作用1.1材料与试剂

破坏细胞膜，作用于核酸,从而影响DNA、RNA以副干酪乳杆菌（Lacticaseibacillusparacasei）、

及蛋白质的合成等[4,且不易产生耐药性，被认为副溶血性弧菌（Vibrioparahaemolyticus）、蜡样芽

是抗生素的一种良好替代品[5-6]。副干酪乳杆菌作孢杆菌（Bacilluscereus）、金黄色葡萄球菌

为乳酸菌的一种,具有抗肿瘤、抗炎、改善和调节（Staphylococcusaureus）由福建省微生物与酶工程

肠道菌群等生物活性7。其在发酵过程中产生的细重点实验室提供，MRS培养基、营养肉汤培养基、

菌素，能有效抑制食源性致病菌，可应用于热敏性LB培养基，广东环凯微生物科技有限公司；琼脂，

食品的冷链运输保鲜[8-9]。如从副干酪乳杆菌FX-6厦门兰博利德生物技术有限公司;TIANampBac-

中分离出细菌素F1,其对细菌和真菌均具有较好teriaDNAKit细菌基因组DNA提取试剂盒

的抑菌活性，可以通过增加细菌膜的通透性，促进