病毒的遗传分析.ppt

第31页,共39页，2024年2月25日，星期天整合态第32页,共39页，2024年2月25日，星期天attP?dgal1?dgal2?dgal3?dgal4?dgal5ABEGHM第33页,共39页，2024年2月25日，星期天位点专一性重组的分子机制一、噬菌体的整合和切除1.λ-DNA对E.coli的整合：POP’+BOB’→BOP’—POB’需要整合酶(Int—拓扑异构酶活性)和整合宿主因子(IHF)参与,非可逆反应。2.λ-DNA从E.coli的切离：BOP’—POB’→POP’+BOB’需要整合酶(Int)、整合宿主因子(IHF)和切除酶(Xis)参与,非可逆反应。第34页,共39页，2024年2月25日，星期天整合的过程:A.具有对特异性DNA强烈亲和力的Int与attP和attB位点结合；B.Int的拓扑异构酶活性，使两条双链各自断开一条单链，瞬间旋转然后交换连接，形成Holliday中间体，C.在另两条单链之间发生同样的断裂重接，从而完成双链间的重组。返回第35页,共39页，2024年2月25日，星期天二、位点专一性重组的核苷酸序列1.POP’:O为15bp(核心)富含A-T的非对称序列；P为-160~0的160bp序列P’为0~80的80bp序列共240bp2.BOB’:B为-11~0序列B’为0~11序列共23bp第36页,共39页，2024年2月25日，星期天第六节环状排列与末端重复一线状DNA具有环状遗传图1?噬菌体DNA结构特点：具末端重复（末端冗余）末端冗余:指DNA分子两端核苷酸顺序相同的现象.致环交换：指基因在遗传图上呈环状排列。2末端重复的实验证据3基因呈环状排列的实验证据二环状排列与末端重复的形成1基因的环状排列图8-24（A）2末端重复杂合子的形成图8-24（B）第37页,共39页，2024年2月25日，星期天第38页,共39页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第39页,共39页，2024年2月25日，星期天关于病毒的遗传分析第一节噬菌体的繁殖和突变型一噬菌体的繁殖（一）烈性噬菌体的感染周期（二）温和性噬菌体的感染周期1溶源周期：原噬菌体:溶源性细菌:溶源性细菌的特点:2裂解周期：溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌↓释放子噬菌体。第2页,共39页，2024年2月25日，星期天第3页,共39页，2024年2月25日，星期天第4页,共39页，2024年2月25日，星期天二噬菌体的突变型(一)快速溶菌突变型（r）(二)宿主范围突变型（h）(三)条件致死突变型1温度敏感突变型2抑制因子敏感突变（sus）噬菌体细菌正常基因sus+su-突变基因sussu+第5页,共39页，2024年2月25日，星期天（1）抑制因子敏感突变的概念：例如：噬菌体mRNA基因细菌tRNA基因反密码子正常突变突变正常基因：5`TAC3`?5`TAG3`3`ATC5`?3`ATG5`????mRNA5`UAC3`5`UAG3`3`AUC5`3`AUG5`??表型：酪氨酸终止5`UAG3`?酪氨酸?酪氨酸3`AUC5`?酪氨酸第6页,共39页，2024年2月25日，星期天表8-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现（2）噬菌体的抑制因子敏感突变型类型及表现琥珀型（amber）UAG赭石型（ocher）UAA乳白型（opal）UGA第7页,共39页，2024年2月25日，星期天一般而言，上述三